Page 170 - Acrobat J Trad-21-3-2566

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 3 Sep-Dec 2023 653

อุตรดิตถ์ ที่สกัดจากตัวท�าละลาย ทั้งหมด 3 ตัวท�า 6. กำรศึกษำหำควำมเข้มข้นที่ต�่ำสุดที่สำมำรถ
ละลาย คือ น�้า เอทานอล และเมทานอล ด้วยวิธี HPLC ยับยั้งกำรเจริญของเชื้อแบคทีเรีย (Minimum

[10]
(High Performance Liquid Chromatography) Inhibitory Concentration: MIC) และควำม
ชั่งสารสกัดหยาบจากหอมแดงลับแล 5 มิลลิกรัม ลง เข้มข้นที่ต�่ำที่สุดที่สำมำรถฆ่ำเชื้อแบคทีเรีย

ในบีกเกอร์ ละลายสารสกัดหอมแดงด้วย DMSO (Minimum Bactericidal Concentration:
ปริมาณ 1 มิลลิลิตร ละลายสารด้วยคลื่นความถี่สูง MBC)

20 นาที น�าไปวิเคราะห์ปริมาณสารเควอซิทิน ด้วย ด้วยวิธี Clinical and Laboratory Standards
HPLC โดย Kinetex 100 A C18 10 ´ 250 mm. ที่ Institute (CLSI), 2009 โดยเติมอาหารเพาะ
[12]
สภาวะ 50-100% v/v, MeOH-H 2O ปริมาตรฉีด 10 เชื้อ Muller Hinton Broth (MHB) ปริมาตร 50
ไมโครลิตร อัตราการไหล 1 มิลลิตรต่อนาที ตรวจวัด ไมโครลิตร ลงใน microplate 96 well ท�าการเจือ

ที่ 254 นาโนเมตร บันทึกผลการวิเคราะห์ปริมาณสาร จางความเข้มข้นของสารสกัด 40-2.5 มิลลิกรัมต่อ
เควอซิทินในสารสกัดหอมแดง มิลลิลิตร เติมเชื้อทดสอบความเข้มข้นประมาณ 106

CFU/ml ปริมาตร 50 ไมโครลิตร ลงไปทุกหลุม ท�าการ
5. กำรทดสอบฤทธิ์ต้ำนอนุมูลอิสระของสำร ทดสอบ 3 ซ�้า โดยใช้ยาปฏิชีวนะ เป็นชุดควบคุมผล

สกัดหอมแดง
บวก และใช้อาหารเพาะเชื้อเป็นชุดควบคุมผลลบ น�า
การตรวจสอบประสิทธิภาพการต้านสารอนุมูล ไปบ่มที่อุณหภูมิ 37˚ซ เป็นเวลา 18-20 ชั่วโมง หยด

อิสระ ด้วยวิธี DPPH radical scavenging activity สี Resazurin ในหลุมทดสอบ และน�าไปบ่มต่อที่
ดัดแปลงวิธีของ Thitilertdecha et al., (2008) อุณหภูมิ 37˚ซ ที่ 4 ชั่วโมง ตรวจสอบและบันทึกผล
[11]
ผสมสารสกัดที่ต้องการทดสอบ 1 มิลลิลิตร กับ การทดลอง จากนั้นหาค่า MBC โดยแตะเชื้อจากหลุม
สารละลาย DPPH ความเข้มข้น 1 มิลลิโมลาร์ ทดสอบมา streak ลงบนอาหารเพาะเชื้อ MHA น�าไป

ปริมาตร 3 มิลลิลิตร ผสมให้เข้ากันตั้งทิ้งไว้ในที่มืด บ่มที่อุณหภูมิ 37˚ซ เป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง ตรวจสอบ
ณ อุณหภูมิห้อง เป็นเวลา 30 นาที วัดค่าการดูดกลืน และบันทึกผลการทดลอง

แสงที่ความยาวคลื่น 517 นาโนเมตร ค�านวณร้อยละ
การยับยั้งสารอนุมูลอิสระ (% inhibition) ดังสมการ ผลกำรศึกษำ
(Acontrol - Asample วัตถุประสงค์ข้อที่ 1 การศึกษาคุณภาพของ
%Inhibition = ´ 100
Axontrol หอมแดงและสารสกัดหยาบจากหอมแดง

โดย A control คือค่าดูดกลืนแสงของกลุ่มควบคุมใช้น�้า อ�าเภอลับแล จังหวัดอุตรดิตถ์
กลั่นแทนตัวอย่าง 1. กำรวิเครำะห์คุณภำพของหอมแดง
A sample คือค่าดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่าง 1.1 ลักษณะทางพฤกษศาสตร์ของหอมแดง

จากผลการส�ารวจการเพาะปลูกหอมแดงจากอ�าเภอ