Page 157 - Acrobat J Trad-21-3-2566
P. 157

640 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก       ปีที่ 21  ฉบับที่ 3  กันยายน-ธันวาคม 2566




                                                       2. วิธีก�รศึกษ�
                                                           2.1  การสกัดสาร

                                                              น�าผักปลังสดทั้งสองชนิดมาล้างท�าความ
                                                       สะอาด หั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ หมักด้วยเอทานอลร้อยละ
                                                       95 ในอัตราส่วน 1:3 ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 วัน จาก

                                                       นั้นกรองด้วยกระดาษกรองแล้วน�าไประเหยแห้งด้วย
                                                       เครื่องระเหยแบบลดความดัน (rotary evaporator)
                                                       ท�าซ�้าอีกสองครั้ง แล้วอบในตู้อบที่อุณหภูมิ 50˚ซ ให้

                                                       ตัวท�าละลายระเหยหมด จากนั้นน�าสารสกัดหยาบ
                                                       ของผักปลังทั้งสองมาท�าการสกัดแยกด้วยวิธี parti-
                                                       tion extraction ซึ่งสารจะถูกแยกออกเป็นสัดส่วน

                                                       (fraction) ตามความสามารถในการละลายหรือ
                                                       ความมีขั้วของสารโดยจะใช้ตัวท�าละลายที่มีขั้วต่าง ๆ

                                                       เริ่มแรกน�าสารสกัดหยาบมาละลายด้วยเมทานอล

                      Figure 1  Basella alba L.        ร้อยละ 95 จากนั้นใส่ในกรวยแยก (separating
                                                       funnel) แล้วเติมตัวท�าละลายลงไปจากขั้วต�่าไป

                                                       ขั้วสูงซึ่งตัวท�าละลายที่ใช้ได้แก่ เฮกเซน (hexane)
                                                       คลอโรฟอร์ม (chloroform) เอทิลอะซีเตต (ethyl

                                                       acetate) บิวทานอล (butanol) และน�้า (deionized
                                                       water) จากนั้นน�าสารสกัดที่ได้เก็บที่อุณหภูมิ -20˚ซ
                                                       จนกว่าจะน�ามาท�าการทดสอบ

                                                           2.2  การทดสอบฤทธิ์ความเป็นพิษต่อเซลล์
                                                       (cytotoxic activity)
                                                           เซลล์มะเร็งที่ใช้ในการทดสอบมี 6 ชนิด ได้แก่

                                                       เซลล์มะเร็งช่องปากชนิด KB (ATCC No. CCL-17)
                                                       เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารชนิด KATO III (ATCC
                                                       No. HTB-103) เซลล์มะเร็งล�าไส้ใหญ่ชนิด SW480

                                                       (ATCC No. CCL-228) และLS 174T (ATCC
                                                       No. CL-188) เซลล์มะเร็งตับชนิด Hep G2 (ATCC

                                                       No. HB 8065) และเซลล์มะเร็งท่อน�้าดีชนิด KKU-
                     Figure 2  Basella rubra L.        M156 ซึ่งเซลล์ KKU-M156 ได้รับการอนุเคราะห์
                                                       จาก ผศ.ดร.ปิติ อึ้งอารีย์วิทยาและศ.ดร.ภก.วีรพล
   152   153   154   155   156   157   158   159   160   161   162