Page 59 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565
P. 59
J Thai Trad Alt Med Vol. 20 No. 3 Sep-Dec 2022 473
3 ชนิดให้มีความเข้มข้นเป็น 1, 5, 10, 15, 20, 30, 40, ตารางที่ 1 สัดส่วนวัฏภ�คเคลื่อนที่ก�รวิเคร�ะห์ส�ร
50 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร จากนั้นเตรียมสารละลาย เคอร์คิวมินอยด์ด้วย HPLC
ของสารสกัดขมิ้นชัน 1 มิลลิกรัม บรรจุในหลอด เวลา (นาที) formic acid (%A) acetonitrile (%B)
ทดลองขนาด 10 มิลลิลิตร เติมเมทานอล 10 มิลลิลิตร 0 80 20
และผสมให้เข้ากันด้วยเครื่องผสมสารเป็นเวลา 10 10 40 60
นาที หลังจากนั้นเจือจาง ให้มีความเข้มข้นสุดท้าย 20 40 60
เป็น 100 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ฉีดสารละลายเข้า 30 80 20
สู่ระบบ HPLC (ยี่ห้อ Waters รุ่น Alliance e2695,
USA) โดยใช้คอลัมน์ชนิด C18 (Symmetry ) 2.3 การเตรียมต�ารับเจลสารสกัดขมิ้นชัน
®
ขนาด 4.6 มิลลิเมตร 5 250 มิลลิเมตร 5 ไมโครลิตร การเตรียมสูตรต�ารับเจลก�าหนดความเข้มข้น
ควบคุมอุณหภูมิที่ 33˚ซ. มีวัฏภาคเคลื่อนที่ (mobile ของสารสกัดขมิ้นชันเป็นร้อยละ 1-2 โดยน�้าหนัก ใช้
phase) เป็น acetonitrile และ formic acid ด้วย Carbopol 934P เป็นสารก่อเจล ใช้ตัวท�าละลายร่วม
ระบบ gradient elution ด้วยสัดส่วน (ตารางที่ 1) เป็น PEG 400 ใช้ cremophor RH#40 เป็นสารช่วย
อัตราการไหล (flow rate) เป็น มิลลิลิตร/นาที ใช้ UV- เพิ่มการละลาย ใช้ glycerin เป็นสารเพิ่มความชุ่ม
Visible detector ตรวจวัดสารที่ความยาวคลื่น 425 ชื้น ใช้ ethylparaben เป็นสารกันเสีย ใช้ butyl-
นาโนเมตร โดยฉีดสารสารละลายตัวอย่างที่ปริมาตร ated hydroxy toluene (BHT) เป็นสารต้านอนุมูล
เท่ากับ 10 ไมโครลิตร (µl) บันทึกและวิเคราะห์ HPLC อิสระ และเบสที่ใช้ในการปรับค่า pH ให้เป็นกลาง คือ
chromatogram วิเคราะห์หาปริมาณเคอร์คิวมินอยด์ tri-ethanol amine (TEA) ปริมาณขององค์ประกอบ
ในสูตรต�ารับ (ตารางที่ 2)
ตารางที่ 2 สูตรตำ�รับเจลส�รสกัดขมิ้นชัน
องค์ประกอบ F1 (g) F2 (g) F3 (g) F4 (g)
Crude turmeric extract 1 2 1 2
Polyethylene glycol (PEG 400) 15 20 15 20
Carbopol 934P 1 1 2 2
Purified water q.s. to make q.s. to make q.s. to make q.s. to make
100 100 100 100
Butylated hydroxy toluene (BHT) 0.01 0.01 0.01 0.01
Glycerin 2 2 2 2
Cremophor RH#40 15 20 15 20
Tri-ethanol amine (TEA) q.s. to make q.s. to make q.s. to make q.s. to make
pH ~ 7 pH ~ 7 pH ~ 7 pH ~ 7
Ethylparaben 0.1 0.1 0.1 0.1
