Page 88 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2565
P. 88
286 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 20 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2565
สกัดหยาบจากกราฟมาตรฐานกรดแกลลิก น�าค่าการดูดกลืนแสงและความเข้มข้นของสารละลาย
มาตรฐานเควอร์ซิตินมาเขียนกราฟมาตรฐานและหา
5. ก�รห�ปริม�ณเฟลโวนอยด์ ด้วยวิธี Alu- ค่าความชันเพื่อใช้วิเคราะห์ปริมาณเฟลโวนอยด์ใน
minium Chloride Colorimetric [16] สารสกัดต่อไป
วิธีการทดสอบดัดแปลงตามวิธีของ Daupor,
[16]
et al เตรียมสารละลายอะลูมิเนียมคลอไรด์เข้มข้น 6. ก�รห�ปริม�ณส�รประกอบแทนนินด้วยวิธี
ร้อยละ 2 โดยชั่งอะลูมิเนียมคลอไรด์ 2 กรัม ละลาย Folin-Ciocaltue phenol method [17]
ด้วยน�้ากลั่นแล้วปรับปริมาตรให้ครบ 100 มิลลิลิตร วิธีการทดสอบดัดแปลงตามวิธีของ Cham, et
เตรียมสารละลายมาตรฐานเควอร์ซิตินเข้มข้น al เตรียมสารละลาย Folin-Ciocaltue phenol
[17]
100 มิลลิกรัมต่อลิตร ปิเปตปริมาตร 10 มิลลิลิตร โดย reagent ความเข้มข้นร้อยละ 10 โดยผสม Folin-
ชั่งเควอร์ซิติน 0.001 กรัม ละลายด้วยน�้ากลั่นแล้วปรับ Ciocaltue phenol 10 มิลลิลิตร ในเอทานอลและ
ปริมาตรให้ครบ 10 มิลลิลิตร น�าสารละลายมาตรฐาน ปรับปริมาตรให้ครบ 100 มิลลิลิตร เตรียมสารละลาย
เควอร์ซิตินเข้มข้น 0.1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มาเจือ โซเดียมคาร์บอเนตความเข้มข้นร้อยละ 7 โดยการ
จางด้วยน�้ากลั่นให้มีความเข้มข้นเป็น 0.005, 0.010, ชั่งโซเดียมคาร์บอเนต 7 กรัม ละลายในน�้ากลั่น
0.020, 0.040 และ 0.080 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ปิเปต ปริมาตร 100 มิลลิลิตร เตรียมสารละลายมาตรฐาน
ปริมาตร 1.5 มิลลิลิตร โดยแยกแต่ละหลอดทดลอง กรดแทนนิกเข้มข้น 200 มิลลิกรัมต่อลิตร เตรียม
น�าหลอดทุกความเข้มข้นมาเติมอะลูมิเนียมคลอไรด์ โดยชั่งกรดแทนนิก 0.002 กรัม ละลายในเอทานอล
เข้มข้นร้อยละ 2 ปริมาตร 1.5 มิลลิลิตร น�าไปเขย่าให้ และปรับปริมาตรให้ครบ 10 มิลลิลิตร ในขวดปรับ
สารผสมกันด้วยเครื่องผสม ตั้งทิ้งไว้ในที่มืด 30 นาที ปริมาตร น�าสารละลายมาตรฐานกรดแทนนิกเข้มข้น
วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 425 นาโน 0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มาเจือจางด้วยเอทานอล
เมตร (A 425) น�าค่าการดูดกลืนแสงและความเข้มข้น ให้มีความเข้มข้นเป็น 0, 0.040, 0.080, 0.120, 0.160
ของสารละลายมาตรฐานเควอร์ซิตินมาเขียนกราฟ และ 0.200 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ปิเปตปริมาตร
มาตรฐานและหาค่าความชันเพื่อใช้วิเคราะห์ปริมาณ 1 มิลลิลิตร จากนั้นเติมน�้ากลั่นลงไปในสารละลาย
เฟลโวนอยด์ในสารสกัดต่อไป มาตรฐานที่เตรียมไว้ 2.5 มิลลิลิตร เติมสารละลาย
การวิเคราะห์ปริมาณเฟลโวนอยด์ในสารสกัด Folin-Ciocaltue phenol reagent เข้มข้นร้อยละ
ตัวอย่าง น�าสารละลายตัวอย่างความเข้มข้น 1000 10 และเติมโซเดียมคาร์บอเนตร้อยละ 7 ปริมาตร 2
มิลลิกรัมต่อลิตร ปริมาตร 10 มิลลิลิตร โดยชั่งสาร มิลลิลิตร เขย่าให้สารผสมกัน ทิ้งไว้ในที่มืดเป็นเวลา
สกัด 0.01 กรัม ละลายตัวท�าละลายที่ใช้สกัดแล้ว 30 นาที แล้วน�าไปวิเคราะห์ค่าการดูดกลืนแสงสูงสุดที่
ปรับปริมาตรให้ครบ 10 มิลลิลิตร น�าสารละมาเจือจาง ช่วงความยาวคลื่น 750 นาโนเมตร (A 750) ด้วยเครื่อง
ด้วยน�้ากลั่นให้มีความเข้มข้นเป็น 0.1, 0.2 และ 0.3 UV-vis Spectrophotometer โดยท�าการทดลองซ�้า
มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ปิเปตปริมาตร 1.5 มิลลิลิตร 3 ครั้ง แล้วหาค่าเฉลี่ย
และท�าวิธีเหมือนกับสารละลายมาตรฐานเควอร์ซิติน การวิเคราะห์ปริมาณแทนนินในสารสกัดหยาบ
