Page 87 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2565

J Thai Trad Alt Med Vol. 20 No. 2 May-Aug 2022 285

2 ครั้ง น�าสารที่กรองได้ทั้ง 3 ครั้งมารวมกันและน�าไป กรดแกลลิก 0.0005 กรัม ละลายด้วยน�้ากลั่นและปรับ
ระเหยตัวท�าละลายออกด้วยเครื่อง evaporator จาก ปริมาตรให้ครบ 10 มิลลิลิตร สร้างกราฟมาตรฐาน

นั้นเก็บไว้ในขวดเก็บสารและน�าไปแช่ที่อุณหภูมิ -80 กรดแกลลิกโดยน�าสารละลายมาตรฐานกรดแกลลิก
องศาเซลเซียส จากนั้นท�าให้แห้งด้วยเครื่อง freeze เข้มข้น 0.05 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร มาเจือจางด้วยน�้า
dryer และเก็บสารสกัดหยาบในขวดปิดมิดชิดเพื่อ กลั่นให้มีความเข้มข้น 0.002, 0.004, 0.006, 0.008,

น�าไปทดสอบต่อไป 0.010, 0.012, 0.014, 0.016 และ 0.018 มิลลิกรัมต่อ
การสกัดแบบต้มด้วยน�้า (boiling water) น�า มิลลิลิตร การหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกรวมท�า
เห็ดที่อบแห้งเรียบร้อยแล้วมาชั่งชนิดละ 10 กรัม ใส่ ได้โดยปิเปตสารละลายปริมาตร 1 มิลลิลิตร เติมน�้า

ในเหยือกสเตนเลสเติมน�้ากลั่นปริมาตร 300 มิลลิลิตร กลั่นปริมาตร 1.5 มิลลิลิตร เติมสารละลาย ที่เข้มข้น
น�าไปต้มบน hotplate โดยให้น�้าเดือดที่อุณหภูมิ 95 ร้อยละ 10 ปริมาตร 0.5 มิลลิลิตร เขย่าให้เข้ากันแล้ว
องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมง จากนั้นกรองเก็บ เติมสารละลายโซเดียมคาร์บอเนตเข้มข้นร้อยละ 7.5

สารละลายด้วยกระดาษกรอง whatman เบอร์ 1 กาก ปริมาตร 1 มิลลิลิตร เขย่าให้สารละลายผสมกันตั้ง
ที่เหลือน�าไปต้มกับน�้ากลั่นและท�าซ�้าเหมือนเดิมอีก 2 ทิ้งไว้ในที่มืด 30 นาที น�าสารละลายไปวัดค่าการดูด

ครั้ง น�าสารที่กรองได้ทั้ง 3 ครั้งมารวมกัน และด�าเนิน กลืนแสงที่ความยาวคลื่น 740 นาโนเมตร (A740)
การเช่นเดียวกับการแช่สกัดด้วยเอทอลและเมทานอล ด้วยเครื่อง UV-Visible spectrophotometer ท�าการ
ร้อยละของผลผลิต = น�้าหนักตัวอย่างหลังการ ทดลองซ�้า 3 ครั้ง แล้วหาค่าเฉลี่ยน�าค่าการดูดกลืนแสง

สกัด/น�้าหนักตัวอย่างแห้งก่อนการสกัด 5 100 และความเข้มข้นของสารละลายมาตรฐานกรดแกลลิก
มาเขียนกราฟมาตรฐานเพื่อเปรียบเทียบปริมาณสาร
4. ก�รห�ปริม�ณส�รประกอบฟีนอลิกรวมของ ประกอบฟีนอลิกรวมในสารสกัดหยาบของเห็ดต่อไป
ส�รสกัดหย�บเห็ดระโงกด้วยวิธี Folin- การวิเคราะห์หาปริมาณสารประกอบฟีนอลิก
Ciocaltue phenol method [15] รวมในสารสกัดหยาบของเห็ดระโงกขาวและเห็ด

วิธีการทดสอบดัดแปลงตามวิธีของ Rat- ระโงกเหลือง โดยเตรียมสารละลายตัวอย่างเห็ดระ
[15]
tana และ Sungthong เตรียมสารละลาย โงกความเข้มข้น 1 กรัมต่อลิตร ปริมาตร 10 มิลลิลิตร
โซเดียมคาร์บอเนตเข้มข้นร้อยละ 7.5 โดยชั่ง โดยชั่งสารสกัดหยาบเห็ดระโงก 0.01 กรัม ละลาย

โซเดียมคาร์บอเนต 7.5 กรัม ละลายด้วยน�้ากลั่นแล้ว ด้วยตัวท�าละลายที่ใช้สกัดแล้วปรับปริมาตรให้ครบ
ปรับปริมาตรให้ครบ 100 มิลลิลิตร เตรียมสารละลาย 10 มิลลิลิตร น�าสารละลายมาเจือจางด้วยน�้ากลั่นให้มี
Folin-Ciocaltue phenol reagent เข้มข้นร้อยละ ความเข้มข้น 0.1, 0.2 และ 0.3 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร

10 โดยผสมสารละลาย Folin-Ciocaltue phenol การหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกรวมท�าได้โดย
reagent ปริมาตร 10 มิลลิลิตรกับน�้ากลั่น ปรับ ปิเปตสารละลายมา 1 มิลลิลิตร ท�าตามขั้นตอนเหมือน

ปริมาตรให้ครบ 100 มิลลิลิตร กับสารมาตรฐานกรดแกลลิกท�าการทดลองซ�้า 3 ครั้ง
เตรียมสารละลายมาตรฐานกรดแกลลิกเข้มข้น แล้วหาค่าเฉลี่ย แล้วน�าค่าการวัดการดูดกลืนแสงที่ได้
50 มิลลิกรัมต่อลิตร ปริมาตร 10 มิลลิลิตร โดยชั่ง ไปค�านวณหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกรวมในสาร