Page 181 - Acrobat J Trad-21-3-2566
P. 181
664 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 21 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2566
ส่งเสริมภูมิปัญญาการแพทย์แผนไทยและแพทย์พื้น benzothiazoline-6-sulfonic Acid), 2,2-Diphenyl-
บ้านไทย, กองวิชาการและแผนงาน, สถาบันการแพทย์ picrylhydrazyl (DPPH), 3(4,5-dimethyl-thia-
แผนไทย กรมการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ zole-2-yl) 2,5, Diphenyl tetrazolium bromide
ทางเลือก, 2561) ประกอบด้วย โกฐเขมา มหาหิงคุ์ (Sigma, USA) Absolute ethanol, Ethyl Acetate,
สิ่งละ 4 ส่วน การบูร กานพลู ดอกจันทน์ ผลพิลัง Folin-Ciocalteu, Alpha-tocopherol, Butylated
กาสา กัญชา สิ่งละ 6 ส่วน โกฐบัว สมอเทศ กะล�าพัก hydroxytoluene (BHT), Fetal bovine serum,
จันทน์ชะมด พริกหอม ดีปลี สิ่งละ 8 ส่วน พริกไทย gallic Acid, L-nitroarginine (L-NA), Quercetin
40 ส่วน ท�าเป็นจุณบดละลายน�้าผึ้งให้กินหนักสลึง ใช้ (Sigma, USA), Ascorbic acid (RCl-Labscan,
แก้ลมอุทธังคมาวาตา แก้ลมอัมพฤกษ์ อัมพาต เป็น Thai), Autoclave (Tomy SX-700, Japan),
เหน็บชา แก้ลมใหญ่ทั้งหลายที่เกิดในกองธาตุ จาก Aluminum chloride (Ajax Finechem, Thai),
การสืบค้นพบว่าข้อมูลงานวิจัยของยาต�ารับนี้ยังน้อย Dulbecco’s modified eagle medium/Nutrient
อยู่มาก ทางผู้วิจัยจึงเกิดแนวคิดที่จะศึกษาฤทธิ์ของ Mixture F-12 (DMEM/F-12) (Sigma-aldrich,
ต�ารับยานี้ โดยทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและต้าน Germany), Penicillin-streptomycin (Invitrogen,
การอักเสบ รวมทั้งทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ของ USA)
ต�ารับยาสมุนไพรดังกล่าว ADTC-5 mouse chondrogenic cells จาก
วัตถุประสงค์ของการศึกษาเพื่อวิเคราะห์ปริมาณ RIKEN BRC ประเทศญี่ปุ่น
สารฟีนอลิกและสารฟลาโวนอยด์รวมถึงทดสอบฤทธิ์
ต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบผ่านกลไกยับยั้ง 2. วิธีก�รศึกษ�
การสร้างไนตริกออกไซด์และความเป็นพิษต่อเซลล์ 2.1 การเตรียมต�ารับยาและสารสกัด
ATDC-5 น�าสมุนไพร ประกอบด้วย พริกไทย 400
กรัม โกฐเขมา มหาหิงคุ์ อย่างละ 40 กรัม การบูร
ระเบียบวิธีศึกษ� กานพลู ดอกจันทน์ ผลพิลังกาสา ใบกัญชา อย่าง
ละ 60 กรัม โกฐหัวบัว สมอเทศ กระล�าพัก จันทน์
1. อุปกรณ์และส�รเคมี ชะมด ดีปลี พริกหอม อย่างละ 80 กรัม (ซื้อจากบริษัท
เครื่องมือและวัสดุ ประกอบด้วย Analytical Bal- เจริญสุขโอสถและเวชพงศ์โอสถ) มาล้างให้สะอาด
ance (4 ต�าแหน่ง Sartorius, Germany), Micro pipette ท�าการอบที่ 60˚ซ จนกว่าจะแห้ง ยกเว้น มหาหิงคุ์
(Gilson, France), microplate reader (Bio-TEK, และการบูร จากนั้นน�ามาบดให้ละเอียดแล้วผ่าน
USA), 96 well plate (Nunc, Denmark), Laminar แร่ง น�ามาประกอบเป็นต�ารับ แล้วน�าไปสกัดด้วย
air flow (Faster, Italy), Centrifuge (Labortechnik, 95% เอทานอล โดยใช้ต�ารับยา 500 กิโลกรัม ต่อ 95%
Germany), Rotary evaporator (Buchi, Switzerland), เอทานอล 2 ลิตร น�าไปตั้งเขย่าไว้ 24 ชั่วโมง น�ามา
CO2 incubator (Gibthai, Thai) กรองเอาส่วนใสและน�ากากมาสกัดต่ออีก 2 ครั้ง น�า
สารเคมี ประกอบด้วย 2,2′-Azino-bis (3-ethyl สารสกัดที่ได้ไประเหยเอาเอทานอลออกให้หมด