Page 99 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 2 May-Aug 2023 315

vertant colony ที่เพิ่มขึ้น 1 ความเข้มข้นหรือมากกว่า ไม่มีอาการทางผิวหนังให้ทดสอบขั้นต้นต่อด้วยวิธีการ
1 ความเข้มข้น แบบ dose-related response อย่าง ดังกล่าวข้างต้น โดยท�าการแปะตัวอย่างทดสอบและ

น้อย 1 สายพันธุ์ ทั้งในระบบที่มีเอนไซม์กระตุ้น ตัวอย่างควบคุม แล้วอ่านผลการทดสอบที่ 1 ชั่วโมง
และไม่มีเอนไซม์กระตุ้น และพบว่ามีความเข้มข้นที่ และ 4 ชั่วโมง ตามล�าดับ หากไม่มีอาการทางผิวหนัง
ให้จ�านวนโคโลนีกลายพันธุ์มากกว่าจ�านวนที่กลาย (ไม่พบการกัดกร่อน) ให้ทดสอบการระคายเคือง (การ

พันธุ์ตามธรรมชาติ (negative control) โดยต้องมี ทดสอบยืนยัน) โดยการแปะตัวอย่างทดสอบและ
อย่างน้อย 1 ความเข้มข้น ที่สามารถท�าให้จ�านวนโค ตัวอย่างควบคุม แล้วอ่านผลการทดสอบเมื่อครบ 4
โลนีกลายพันธุ์สูงเกิน 2 เท่าของการกลายพันธุ์ตาม ชั่วโมง โดยอ่านผลทดสอบอีก 4 ครั้ง ในชั่วโมงที่ 1,

ธรรมชาติ 24, 48 และ 72 หลังเอาแผ่นแปะตัวอย่างออก ให้
2.5.2 การทดสอบการระคายเคืองทาง คะแนนระดับการเกิดรอยแดง (erythema) และบวม
ผิวหนัง/การกัดกร่อนในสัตว์ทดลองด้วยวิธีการตาม (oedema) บริเวณทดสอบ 0 ถึง 4 คะแนน สังเกต

OECD Guidelines No.404 [18] สุขภาพสัตว์และประเมินผลการกัดกร่อน โดยหากพบ
การทดสอบการระคายเคืองทางผิวหนัง/ ปฏิกิริยาการกัดกร่อนบริเวณที่แปะตัวอย่างทดสอบ

การกัดกร่อนในสัตว์ทดลองของเจลสารสกัดราก เช่น เนื้อตาย (necrosis) แผลหลุม (ulcer) เลือดไหล
ทองพันชั่งใช้วิธีตาม Test No. 404 ได้รับอนุมัติให้ (bleeding) สะเก็ดแผล (bloody scabs) จะให้สิ้นสุด
ด�าเนินการวิจัยในสัตว์จากคณะกรรมการดูแลการ การทดสอบทันที หากไม่พบการกัดกร่อน สัตว์จะถูก

เลี้ยงและใช้สัตว์ทดลองของกรมวิทยาศาสตร์การ สังเกตอากการต่ออีก 14 วัน หลังเอาแผ่นแปะออก
แพทย์ [หมายเลขควบคุมโครงการ 63-031 (62-018)] หากพบว่าสีผิวหนังเปลี่ยนไป หรือสีซีดลง มีภาวะ

ใช้กระต่ายสายพันธุ์ New Zealand White จากศูนย์ ขนร่วงและแผลเป็น วิการที่บ่งบอกว่าเป็นความเสีย
สัตว์ทดลองแห่งชาติ มหาวิทยาลัยมหิดล จ�านวน 3 หายทางผิวหนังที่ไม่สามารถกลับคืนสู่ปกติ จะสรุป
ตัว ไม่ระบุเพศ ไม่จ�ากัดอายุ มีน�้าหนักไม่น้อยกว่า 2 ว่าตัวอย่างทดสอบมีคุณสมบัติการกัดกร่อน ประเมิน

กิโลกรัม แยกเลี้ยงแต่ละตัวในกรงขนาดมาตรฐานเพื่อ ผลการระคายเคืองโดยสังเกตการบวมหรือแดงตาม
ปรับสภาพเป็นเวลา 1 สัปดาห์ก่อนการทดสอบ การ ระยะเวลาที่ทดสอบ กรณีพบวิการให้ติดตามสุขภาพ
ดูแลสัตว์ทดลองเป็นไปตามมาตรการเลี้ยงสัตว์สากล สัตว์ต่ออีก 14 วัน เพื่อดูว่าวิการที่เกิดขึ้นสามารถ

และให้สัตว์กินอาหารและน�้าอย่างไม่จ�ากัดปริมาณ กลับสู่ปกติได้หรือไม่ นอกจากนี้ สังเกตสุขภาพสัตว์
ก่อนเริ่มทดสอบ 24 ชั่วโมง โกนขนกระต่ายบริเวณ นอกเหนือจากวิการทางผิวหนัง ได้แก่ น�้าหนักสัตว์
หลังด้วยเครื่องโกนไฟฟ้า ใช้ตัวอย่างทดสอบเจลสาร ทดลอง การกินอาหารและน�้า อัตราการตาย อาการ

สกัดรากทองพันชั่ง 0.5 กรัม แปะลงบนต�าแหน่งที่ แสดงออกหรือพฤติกรรมที่ผิดปกติ รวมถึงอาการ
ทดสอบ และใช้น�้ากลั่นปราศจากเชื้อปริมาตร 0.5 ไม่พึงประสงค์ที่ส่งผลกระทบทั่วร่างกาย (systemic

มิลลิลิตรเป็นตัวอย่างควบคุม ทดสอบการกัดกร่อน adverse effects) ค�านวณผลการทดสอบโดยน�า
(การทดสอบขั้นต้น) โดยการแปะตัวอย่างทดสอบและ ข้อมูลการสังเกตเฉพาะที่เวลา 24 ชั่วโมง, 48 ชั่วโมง
ตัวอย่างควบคุม 3 นาที แล้วอ่านผลการทดสอบ หาก และ 72 ชั่วโมง มาค�านวณคะแนนเฉลี่ยของการแดง