Page 88 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

502 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

เปนสวนประกอบในตํารับมาลางทําความสะอาด แลว เทียบกับสารมาตรฐานกรดแกลลิค แสดงคาเปน Gal-
อบใหแหง บดแยกแตละชนิดใหเปนผงบดหยาบแลว lic acid equivalent (GAE) [12-13] ทํา 5 ตัวอยาง

นํามาผานแรงเบอร 60 นําผงบดหยาบผสมกันตาม 2.3 การทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระโดยวิธี
อัตราสวนเปนตํารับยาบํารุงไขขอ แลวชั่งตัวอยาง 100 ABTS radical scavenging Assay
กรัม แยกสกัดดวยตัวทําละลายตาง ๆ ชนิดละ 1,000 2.3.1 เตรียมสารละลายวิตามินอีความ

มิลลิลิตร ไดแก นํ้า โดยการเติมนํ้าแลวตมจนปริมาตร เขมขน 0-50 mg/ml โดยใชเอทานอล 70% เปนตัว
ลดลงเหลือ 1 ใน 3 สวนตัวทําละลายอีก 3 ชนิด ไดแก ทําละลาย
เอทานอล 95% เอทิลอะซิเตท และ เฮกเซน แชเปน 2.3.2 เตรียมสารละลายของสารสกัดความ

เวลา 7 วัน คนวันละ 1 ครั้ง แลวกรองผานผาขาวบาง เขมขน 1 mg/ml โดยใช propylene glycol เปนตัวทํา
และกระดาษกรองเบอร 1 นําสารสกัดมาระเหยตัว ละลาย แลวเจือจางใหไดความเขมขน 50, 100, 200,
ทําละลายออกโดยใชเครื่องกลั่นระเหยสุญญากาศ 400 และ 800 mg/ml ดวยเอทานอล 70%

(rotary evaporator) [12-13] 2.3.3 เตรียม positive control โดยใช
2.2 การหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกรวม เอทานอล 70% เปนตัวทําละลาย

2.2.1 เตรียมสารละลายมาตรฐานกรด 2.3.4 เตรียมสารละลาย 7 mM ABTS
แกลลิคความเขมขน 50-100 mg/ml โดยใชเอทานอล โดยใชนํ้าเปนตัวทําละลาย
70% เปนตัวทําละลาย 2.3.5 เตรียมสารละลาย 2.45 mM potas-

2.2.2 เตรียมสารละลายของสารสกัดความ sium persulfate โดยใชนํ้าเปนตัวทําละลาย
เขมขน 10 mg/ml โดยใช propylene glycol เปนตัว 2.3.6 เตรียมสารละลายอนุมูลอิสระ

ทําละลาย แลวเจือจางใหไดความเขมขน 2 mg/ml ABTS โดยปิเปตสารละลาย 7mM ABTS และ 2.45
ดวยเอทานอล 70% mM potassium persulfate มาอยางละ 2.5 ml บม
2.2.3 เตรียม positive control โดยใช ในที่มืด ที่อุณหภูมิหองเปนเวลา 16 ชั่วโมง แลวเจือ

20% propylene glycol ในเอทานอล 70% เปนตัวทํา จางดวยเอทานอล 95%
ละลายสําหรับสารสกัด และเอทานอล 70% เปนตัวทํา 2.3.7 ปิเปตสารละลายในขอ 2.3.2 จํานวน
ละลาย 50 ml และสารละลายในขอ 2.3.6 จํานวน 950 ml ลง

2.2.4 ปิเปตสารละลายในขอ 2.2.2 จํานวน ใน microtube ขนาด 2,000 ml ผสมใหเขากันแลว
100 ml และสารละลาย 10%v/v Folin-Ciocalteu ตั้งในที่มืด ที่อุณหภูมิหองเปนเวลา 30 นาที แลว
จํานวน 200 ml ลงใน microtube ขนาด 2,000 ml ปิเปตสารที่บมแลวมา 200 ml ใส 96 well plate วัดคา

บมเปนเวลา 5 นาที เติมสารละลาย 0.7 M sodium การดูดกลืนแสงที่ 734 นาโนเมตร ดวย microplate
carbonate 800 ml ผสมใหเขากัน แลวตั้งในที่มืด ที่ reader โดยเทียบกับสารมาตรฐานวิตามินอี แสดงคา

อุณหภูมิหองเปนเวลา 2 ชั่วโมง แลวปิเปตสารที่บม เปน vitamin E equivalent antioxidant capacity
[13]
แลวมา 200 ml ใส 96 well plate วัดคาการดูดกลืน (EEAC) ทํา 5 ตัวอยาง
แสงที่ 765 นาโนเมตร ดวย microplate reader โดย 2.4 การทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ โดยวิธี