Page 198 - วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 19 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2564
P. 198
428 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 19 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2564
ง. การพิสูจน์โครงสร้างทางเคมีของสาร กระชายเป็นสารเทียบ (chemical marker)
บริสุทธิ์ที่แยกได้ โดยวิเคราะห์โครงสร้างทางเคมี การเตรียมสารละลายตัวอย่าง โดยสกัดผงกระชาย
้
ของสารบริสุทธิ์จากข้อมูลสเปกตรัม 1D-NMR และ นำาหนัก 1 กรัม ในเมทานอล ปริมาตร 10 มิลลิลิตร
2D-NMR (ส่งวิเคราะห์ที่ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ โดยวิธีรีฟลักซ์ (reflux) เป็นเวลา 5 นาที กรอง ได้
และเทคโนโลยี จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย) วิเคราะห์ สารละลายตัวอย่าง
้
นำาหนักโมเลกุลด้วย HPLC-QTOF เพื่อยืนยันสูตร การเตรียมสารละลายมาตรฐาน โดยละลาย
โครงสร้าง และเปรียบเทียบข้อมูลสเปกตรัม NMR สารพิโนสโตรบิน นำ้าหนัก 1 มิลลิกรัม ในเมทานอล
ของสารที่เคยมีรายงานมาก่อน ปริมาตร 1 มิลลิลิตร
จ. ศึกษาความบริสุทธิ์ (purity) ของสาร ระบบโครมาโทกราฟี
ที่แยกได้ โดยวิเคราะห์ความบริสุทธิ์ของสารด้วยวิธี วัฏภาคคงที่ silica gel 60, ความหนา
UPLC ซึ่งระบบโครมาโทกราฟี ประกอบด้วย วัฏภาค 0.25 มิลลิเมตร
TM
คงที่ คือ Acquity BEH C18 column ขนาด 1.7 วัฏภาคเคลื่อนที่ ไดคลอโรมีเทน-เมทานอล
ไมโครเมตร, 2.1 × 50 มิลลิเมตร วัฏภาคเคลื่อนที่ 70:1
ได้แก่ A. เมทานอล-อะซิโทไนไตรล์ (1:1) และ B. นำา ้ ระยะทางการเคลื่อน 15 เซนติเมตร
กำาจัดอิออน ชะแบบเกรเดียนต์ (gradient elution) ที่ของวัฏภาคเคลื่อนที่
อัตราการไหล 0.65 มิลลิลิตรต่อนาที ตรวจวัดที่ ปริมาตรวิเคราะห์ 15 ไมโครลิตร สำาหรับ
ความยาวคลื่น 290 นาโนเมตร ความบริสุทธิ์ของสาร สารละลายตัวอย่าง
ที่แยกได้พิจารณาจากร้อยละของพื้นที่ใต้พีค (%peak 5 ไมโครลิตร สำาหรับ
area) ของสารนั้น และสังเกต 3D-spectrum ว่าต้อง สารละลายมาตรฐาน
ไม่มีการปนของสารอื่น (co-elute) ในพีคของสารที่ การตรวจวัด พ่นนำ้ายา NP/PEG แล้ว
แยกได้ สังเกตผลภายใต้แสง
ฉ. ศึกษาความคงตัว (stability) ของ อัลตราไวโอเลตที่ความ
สารบริสุทธิ์ที่แยกได้ โดยเปรียบเทียบความคงตัว ยาวคลื่น 366 นาโนเมตร
ของสารละลายสารบริสุทธิ์ที่แยกได้จากกระชายโดย
ละลายในเมทานอล กับสารละลายพิโนสโตรบินจาก ผลก�รศึกษ�
บริษัทผู้ผลิตซึ่งละลายในเมทานอลเช่นเดียวกัน และ
ฉีดเข้าสู่ระบบโครมาโทกราฟีของ UPLC ดังข้อ จ. ดู 1. ก�รแยกส�รพิโนสโตรบินจ�กกระช�ย
ลักษณะของ 3D-spectrum ผงกระชายแห้ง นำ้าหนัก 1 กิโลกรัม นำามาแยก
2.2 การตรวจเอกลักษณ์ทางเคมีของกระชาย ได้สารพิโนสโตรบินบริสุทธิ์ นำ้าหนักผลผลิต 8.6 กรัม
ด้วยวิธีรงคเลขผิวบาง (Thin Layer Chromato- คิดเป็นร้อยละของผลผลิต (%yield) เท่ากับ 0.86 เมื่อ
graphy: TLC) โดยใช้สารพิโนสโตรบินที่แยกได้จาก เทียบกับนำ้าหนักผงกระชายแห้ง
