Page 133 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 2 May-Aug 2023 349

เล็กน้อยที่ความเข้มของสีสารสกัด โดยสารสกัดที่ใช้ Dual) จึงท�าการทดสอบผลของสารสกัดต่อความ
ระยะเวลาต้ม 10 นาที (LC10FM0) มี % yield เท่ากับ สามารถในการเพิ่มจ�านวนของเซลล์แมคโครฟาจ

2.47% สารสกัดมีสีเหลืองอมเขียวอ่อน สารสกัดที่ใช้ (RAW-Dual) พบว่าสารสกัดทั้ง 3 ชนิด สามารถลด
ระยะเวลาต้ม 20 นาที (LC20FM0) % yield เท่ากับ การเพิ่มจ�านวนของเซลล์แมคโครฟาจ (RAW-Dual)
2.63% สารสกัดมีสีเหลืองอมเขียว เข้มกว่าสารสกัดที่ โดยสารสกัด LC10FM0 เห็นผลการลดลงของการ

ได้จากการสกัดที่ระยะเวลา 10 นาที ส่วนสารสกัดที่ใช้ เพิ่มจ�านวนเซลล์ตั้งแต่ 72 ชั่วโมงหลังจากได้รับสาร
ระยะเวลาต้ม 30 นาที (LC30FM0) % yield เท่ากับ สกัด (Figure 2) ในขณะที่สารสกัด LC20FM0 และ
2.51% สารสกัดมีสีเหลืองอมเขียวเข้มมากที่สุด LC30FM0 เห็นผลการลดลงของการเพิ่มจ�านวนเซลล์

2. ผลการทดสอบความเป็นพิษของสารสกัด ตั้งแต่ 48 ชั่วโมงหลังจากได้รับสารสกัด (Figure 3-4)
เครื่องแกงเลียงในเซลล์เพาะเลี้ยงชนิดต่าง ๆ 3. ผลของสารสกัดเครื่องแกงเลียงต่อการ
เมื่อน�าสารสกัดเครื่องแกงเลียงที่สกัดด้วย แสดงออกของการท�างานของวิถีชีวโมเลกุล NF-kb

ระยะเวลา 10, 20, 30 นาที (LC10FM0, LC20FM0, ในการศึกษาผลของสารสกัดเครื่องแกงเลียงต่อ
LC30FM0) ไปท�าการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ การแสดงออกของการท�างานของวิถีชีวโมเลกุล NF-k

เพาะเลี้ยงที่เป็นตัวแทนของเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิด ซึ่งเป็นหนึ่งในกลไกการท�างานของเซลล์ภูมิคุ้มกัน
แมคโครฟาจ (RAW-Dual), เซลล์เยื่อบุหลอดเลือด ชนิดแมคโครฟาจนั้น การศึกษานี้ได้ท�าการศึกษา
[13]
(EA.hy926), เซลล์เยื่อบุปอด (Bease-2B), เซลล์ตับ ตามวิธีของ Dold NM et al. คือ ท�าการกระตุ้น
(HepG2), และ เซลล์เยื่อบุทางเดินอาหาร (HT-29) การท�างานของโปรตีน NF-kb โดยในเซลล์แมคโคร-
พบว่าสารสกัดทั้ง 3 ชนิดมีผลลด cell viability ใน ฟาจชนิด Raw-Dual ซึ่งเป็นเซลล์ที่พัฒนาให้มีระบบ

เซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดแมคโครฟาจ (RAW-Dual) reporter gene assay ที่บ่งชี้ถึงระดับการท�างานของ
โดยผลการลด cell viability เพิ่มขึ้นตามความเข้มข้น NF-kb ได้ด้วยการวัดความเข้มข้นของ secreted
ของสารสกัด โดย LC30FM0 แสดงผลในการลด cell embryonic alkaline phosphatase (SEAP) จาก

viability ได้เด่นชัดที่สุด ผลของสารสกัดทั้ง 3 ชนิด การทดลองพบว่า สารสกัดเครื่องแกงเลียงที่สกัด
สามารถลด cell viability ของเซลล์เยื่อบุหลอดเลือด ด้วยระยะเวลา 10 นาที (LC10FM0) มีแนวโน้มที่จะ
(EA.hy926) และเซลล์เยื่อบุปอด (Bease-2B) และ เพิ่มการท�างานของ NF-kb ในขณะที่สารสกัดเครื่อง

เซลล์เยื่อบุทางเดินอาหาร (HT-29) ได้แต่ไม่ชัดเจน แกงเลียงที่สกัดด้วยระยะเวลา 20 นาที (LC20FM0)
และไม่เพิ่มขึ้นตามความเข้มข้นของสารสกัด สารสกัดทั้ง ไม่มีผลต่อการท�างานดังกล่าวของเซลล์แมคโครฟาจ
3 ชนิดมีผลเพิ่ม cell viability ในเซลล์ตับ (Figure 1) ส่วนสารสกัดเครื่องแกงเลียงที่สกัดด้วยระยะเวลา

2. ผลของสารสกัดเครื่องแกงเลียงต่อการ 30 นาที (LC30FM0) มีแนวโน้มลดการท�างานของ
เจริญเติบโตของเซลล์แมคโครฟาจ (RAW-Dual) NF-kb ในภาวะปกติของเซลล์ (Figure 5) จากนั้น

เนื่องจากสารสกัดเครื่องแกงเลียงทั้ง 3 ชนิดมี จึงท�าการทดสอบเพิ่มเติมในภาวะที่เซลล์ได้รับการ
ผลต่อ cell viability ของเซลล์แมคโครฟาจ (RAW- กระตุ้นการท�างานของ NF-kb ด้วย Pam3Cys-Ser-