Page 212 - วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 19 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2564

442 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 19 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2564

tube แล้วปล่อยให้อุณหภูมิลดลงเหลือประมาณ 45 สารสกัดรากทองพันชั่งที่ปริมาตรต่าง ๆ กับจานเพาะ
องศาเซลเซียส เติมเชื้อเดอร์มาโตไฟต์ที่เตรียมสำาหรับ เลี้ยงที่ไม่ใส่สารทดสอบ (non-treated)

ทดสอบปริมาตร 300 ไมโครลิตรลงในอาหารเหลวอุ่น 2.6 การทดสอบประสิทธิผลในการต้านเชื้อรา
จากนั้นผสมให้เข้ากัน แล้วเทอาหารเหลวที่ผสมกับ ของเจลสารสกัดรากทองพันชั่งในสัตว์ทดลอง
เชื้อปริมาตร 5 มิลลิลิตร ลงบน bottom agar เอียง 2.6.1 เชื้อจุลชีพ

จานเพาะเลี้ยงไปมาทุกด้านเพื่อให้ soft agar คลุมทั่ว เชื้อราสำาหรับการทดสอบใช้ M. canis 13-
บริเวณหน้า bottom agar (คิดเป็นพื้นที่ประมาณ 57 60-04317 ที่เจือจางเชื้อใน 0.85% sodium chloride
7
ตารางเซนติเมตร) และทิ้งไว้ให้อาหารแข็งตัวประมาณ เพื่อให้มีความเข้มข้นของเชื้อ 1 x 10 conidia ต่อ
15-20 นาที ทำาการทดสอบฤทธิ์ต้านเชื้อราโดยใช้ มิลลิลิตร
เจลสารสกัดรากทองพันชั่งหรือเจลพื้นปริมาตร 200 2.6.2 การทดสอบ
ไมโครลิตร นำามา spread ลงบนจานเพาะเลี้ยงโดย การศึกษาประสิทธิผลของเจลสารสกัดราก

ใช้ glass spreader บนผิวหน้าของอาหารแข็งแห้ง ทองพันชั่งต่อการต้านเชื้อราในสัตว์ทดลองใช้วิธีการที่
จากนั้นนำาจานเพาะเชื้อไปเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 35 ดัดแปลงจาก Ghannoum MA. และคณะ [20-21] และ

องศาเซลเซียส เป็นระยะเวลา 3-5 วัน และประเมิน ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการดูแลการเลี้ยงและใช้
ผลการทดสอบเปรียบเทียบกับจานเพาะเลี้ยงที่ไม่ใส่ สัตว์ทดลองของกรมวิทยาศาสตร์การแพทย์ให้ดำาเนิน
สารทดสอบ (non-treated) การวิจัยในสัตว์ (หมายเลขควบคุมโครงการ 61-001)

3) การทดสอบฤทธิ์ต้านเชื้อราโดยใช้เทคนิค เลือกใช้หนูตะเภาสายพันธุ์ Hartley เพศผู้นำ้าหนัก
over-agar antibiotic plating ประมาณ 150-170 กรัม ตรวจประเมินสุขภาพแล้วสุ่ม

การทดสอบใช้เจลสารสกัดรากทองพันชั่ง หนูตะเภาใส่ในกรงเลี้ยงขนาดมาตรฐาน และเลี้ยงเพื่อ
ที่ปริมาตร 50, 100, 200, และ 400 ไมโครลิตร หรือเจล ปรับสภาพเป็นเวลา 5 วันก่อนการทดสอบ การดูแล
พื้นปริมาตร 400 ไมโครลิตร นำามา spread ลงบนจาน สัตว์ทดลองเป็นไปตามมาตรการเลี้ยงสัตว์สากล และ

เพาะเลี้ยงที่มีอาหารแข็งชนิด Sabouraud dextrose ให้สัตว์กินอาหารและนำ้าอย่างไม่จำากัดปริมาณ การ
agar ใน plastic petri dishes (90 mm DIA) โดย ทดสอบแบ่งหนูตะเภาออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มละ 6 ตัว
ใช้ glass spreader จนผิวหน้าของอาหารแข็งแห้ง ประกอบด้วย กลุ่มที่ 1: ไม่ได้รับเชื้อ M. canis และ

จากนั้นหยดเชื้อจุลชีพสำาหรับทดสอบที่เตรียมจากเชื้อ ไม่ได้รับสารทดสอบ (negative control), กลุ่มที่ 2:
ราแต่ละชนิดปริมาตร 20 ไมโครลิตร (ความหนาแน่น ได้รับเชื้อ M. canis และได้รับยาต้านเชื้อรา Nizoral
®
ของเชื้อประมาณ 2-10 x 10 เซลล์) ลงบนจานอาหาร cream (2% ketoconazole), กลุ่มที่ 3: ได้รับเชื้อ
4
เพาะเลี้ยงที่เตรียมไว้ รอจนกระทั่งเชื้อจุลชีพสำาหรับ M. canis และได้รับเจลสารสกัดรากทองพันชั่ง (0.1%
ทดสอบบนผิวอาหารแข็งแห้ง แล้วนำาจานเพาะเชื้อไป ไรนาแคนทิน ซี), กลุ่มที่ 4: ได้รับเชื้อ M. canis และ

เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส เป็นระยะเวลา ได้รับเจลสารสกัดรากทองพันชั่ง (0.05 % ไรนาแคน-
3 วัน และประเมินผลการทดสอบโดยเปรียบเทียบการ ทิน ซี) และกลุ่มที่ 5: ได้รับเชื้อ M. canis และไม่ได้
เจริญของเชื้อราในจานเพาะเลี้ยงที่มีเจลพื้น หรือมีเจล รับสารทดสอบ (non-treated) หลังจากเลี้ยงปรับ