Page 195 - Acrobat J Trad-21-3-2566

678 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 21 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2566

จากการปลูกในสถาบันวิจัยสมุนไพร จังหวัดนนทบุรี มิลลิลิตร ตามล�าดับ
จ�านวน 3 ตัวอย่าง น�ามาล้างท�าความสะอาดผึ่งให้ ระบบโครมาโทกราฟี

สะเด็ดน�้า แล้วน�ามาหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ ตากให้แห้งจาก คอลัมน์ Shimadzu Shim-pack
นั้นน�ามาอบในตู้อบร้อนที่อุณหภูมิ 50˚ซ เป็นเวลา GIST C18 4.6 5 150 mm

วันละ 8 ชั่วโมงติดต่อกัน 2 วัน แล้วน�าไปบดให้ 5 micron with Guard
ละเอียดโดยใช้เครื่องปั่น จากนั้นน�ามาบดด้วยโกร่งอีก Column 4.0 5 10 mm

ครั้งจนละเอียด น�าไปบรรจุในถุงเก็บตัวอย่างปิดปาก วัฏภาคเคลื่อนที่ A: 0.1% Trifluoroacetic
ถุงให้สนิท acid ในน�้า

แคลลัสปอบิด – น�าแคลลัสมาผึ่งลม B: Acetonitrile; Isocratic
ประมาณ 2-3 ชั่วโมง จากนั้นน�ามาอบในตู้อบร้อนที่ ปริมาตรวิเคราะห์ 10 ไมโครลิตร

อุณหภูมิ 50˚ซ เป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นน�าไปบด 2.6 การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติ
ให้ละเอียดโดยใช้โกร่ง เมื่อละเอียดแล้วน�าไปบรรจุใน วิเคราะห์ข้อมูลด้วยโปรแกรม SPSS ver-

ถุงเก็บตัวอย่างปิดปากถุงให้สนิท sion 16.0 ทดสอบความแตกต่างของค่าเฉลี่ยโดยวิธี
2.5.2 การเตรียมตัวอย่างส�าหรับวิเคราะห์ Duncan’s New Multiple Range Test (DMRT)

ด้วย HPLC ที่ระดับนัยส�าคัญ 0.01
น�าสมุนไพรปอบิด 500 มิลลิกรัม ต้มกับ ผลกำรศึกษำ

1% กรดไฮโดรคลอริกในน�้า ปริมาตร 50 มิลลิลิตร
เป็นเวลา 30 นาที น�ามากรอง จากนั้นน�ามา partition 1. กำรฟอกฆ่ำเชื้อชิ้นส่วนของต้นปอบิด

กับไดเอทิลอีเทอร์ ปริมาตร 50 มิลลิลิตร จ�านวน 2 จากการฟอกชิ้นส่วนข้อปอบิดที่ฆ่าเชื้อด้วย
ครั้ง น�าชั้นไดเอทิลอีเทอร์ มาระเหยแห้ง จากนั้นสกัด โซเดียมไฮโปคลอไรต์ 5 ความเข้มข้น น�ามาเลี้ยงบน

ด้วยเมทานอล 2 มิลลิลิตร กรองด้วย nylon syringe อาหารสูตร MS พบว่าการฟอกโดยใช้ไฮเตอร์ครั้ง
filter 0.45 ไมครอน ส�าหรับการน�าไปฉีด HPLC แรกร้อยละ 10 เป็นเวลา 20 นาที และฟอกครั้งที่ 2

2.5.3 การเตรียมสารมาตรฐาน ใช้ไฮเตอร์ร้อยละ 10 เป็นเวลา 10 นาที มีการปลอด
ชั่งสารมาตรฐาน rosmarinic acid ปริมาณ เชื้อสูงสุดในช่วงระยะเวลา 14 วัน มีค่าเท่ากับ ร้อยละ

5 มิลลิกรัม ปรับปริมาตรด้วยเมทานอล ใน volu- 80.5 รองลงมาคือ การฟอกโดยใช้ไฮเตอร์ครั้งแรก
metric flask ขนาด 5 มิลลิลิตร น�าสารละลายที่ได้ ร้อยละ 10 เป็นเวลา 20 นาที และฟอกครั้งที่ 2 ใช้

pipette ใน volumetric flask ขนาด 2 มิลลิลิตร ใน ไฮเตอร์ร้อยละ 10 เป็นเวลา 5 นาที ความเข้มข้นที่น้อย
ปริมาตร 2000, 1000, 500, 250, 125 ไมโครลิตร ปรับ กว่านี้ท�าให้การปลอดเชื้อลดลง (Table 1) เมื่อน�ามา

ปริมาตรให้ได้สารละลายมาตรฐาน rosmarinic acid เลี้ยงต่อเป็นระยะเวลา 20 วัน พบว่าปอบิดมีการเจริญ
ความเข้มข้น 1, 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625 มิลลิกรัม/ เติบโตในส่วนของยอดและใบที่ดี