Page 194 - Acrobat J Trad-21-3-2566

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 3 Sep-Dec 2023 677

ด้วยหลอดไฟฟลูออเรสเซนต์ 16 ชั่วโมงต่อวัน ความ หลอดฟลูออเรสเซนต์ ตั้งเวลาการให้แสงเท่ากับ 16
เข้มแสง 3,000 ลักซ์ ที่อุณหภูมิ 25 ± 2˚ซ เป็นระยะ ชั่วโมงต่อวัน ด้วยเครื่องตั้งเวลาเปิด-ปิดอัตโนมัติ

เวลา 2 เดือน (Timer) วางแผนการทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์ (Com-
1. ฟอกด้วยไฮเตอร์ ที่ความเข้มข้น pletely Randomized block Design : CRD) ท�าการ
®
ร้อยละ 15 นาน 10 นาที และไฮเตอร์ ร้อยละ 15 ทดลอง 15 ซ�้า แต่ละซ�้ามี 1 ชิ้น (1 ชิ้นต่อขวด) เพาะ
®
นาน 10 นาที (T1) เลี้ยงเนื้อเยื่อเป็นเวลา 2 เดือน ท�าการบันทึกผลการ

2. ฟอกด้วยไฮเตอร์ ที่ความเข้มข้น เกิดแคลลัส สีของแคลลัส ในสูตรอาหารที่แตกต่างกัน
®
ร้อยละ 10 นาน 15 นาที และไฮเตอร์ ร้อยละ 10 2.4 การศึกษาการเจริญเติบโตของแคลลัสใน
®
นาน 10 นาที (T2) อาหารสูตรที่เหมาะสม
3. ฟอกด้วยไฮเตอร์ ที่ความเข้มข้น ท�าการคัดเลือกอาหารสูตรที่เหมาะสม
®
ร้อยละ 10 นาน 20 นาที และไฮเตอร์ ร้อยละ 10 ส�าหรับการชักน�าแคลลัส โดยดูจากขนาดของแคลลัส
®
นาน 5 นาที (T3) ตั้งแต่เกิดแคลลัสปานกลางและเริ่มเกาะตัวกัน

4. ฟอกด้วยไฮเตอร์ ที่ความเข้มข้น (คะแนน ++) และเกิดแคลลัสมากและเกาะตัวอย่าง
®
ร้อยละ 10 นาน 20 นาที และไฮเตอร์ ร้อยละ 10 หนาแน่น (คะแนน +++) เลือกแคลลัสที่เกิดสีเขียว
®
นาน 10 นาที (T4) หรือสีเขียวปนเหลือง เพื่อน�ามา subculture ลง
5. ฟอกด้วยไฮเตอร์ ที่ความเข้มข้น บนอาหารสูตรเดิมอีกครั้ง เลี้ยงในห้องปลอดเชื้อที่
®
ร้อยละ 10 นาน 20 นาที และไฮเตอร์ ร้อยละ 10 ควบคุมสภาพแวดล้อม โดยมีอุณหภูมิ 25± 2˚ซ
®
นาน 7 นาที (T5) ความเข้มแสง 3,000 ลักซ์ จากหลอดฟลูออเรสเซนต์

2.3 การศึกษาสูตรอาหารที่เหมาะสมต่อการ ตั้งเวลาการให้แสงเท่ากับ 16 ชั่วโมงต่อวัน วางแผนการ
ชักน�าให้เกิดแคลลัส ทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์ (Completely Randomized

ศึกษาสูตรอาหารที่เหมาะสมต่อการชักน�าให้ block Design : CRD) ท�าการทดลอง 15 ซ�้า แต่ละซ�้า
เกิดแคลลัส โดยน�าเนื้อเยื่อส่วนยอดที่ปลอดเชื้อมา มี 4 ชิ้น (4 ชิ้นต่อขวด) เพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเป็นเวลา 45

subculture น�ามาทดลองเพาะเลี้ยงในอาหาร MS ที่ วัน บันทึกน�้าหนักสดและน�้าหนักแห้งต่อขวด
เติมสารควบคุมการเจริญเติบโตสูตรชักน�าแคลลัสที่ 2.5 การศึกษาสาร rosmarinic acid ของ

ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ ได้แก่ อาหารสูตร IBA 1-5 ปอบิดด้วย High Performance Liquid Chroma-
มิลลิกรัมต่อลิตร (mg/l) 1.25MS+IBA 1-5 mg/l tography (HPLC)

KN 1-5 mg/l TDZ 0.2-1.5 mg/l และ TDZ 0.2-1.5 2.5.1 การเตรียมตัวอย่างพืชส�าหรับการ
mg/l ร่วมกับ NAA 0.1-1 mg/l รวมจ�านวน 26 สูตร ตรวจวิเคราะห์

เลี้ยงในห้องปลอดเชื้อที่ควบคุมสภาพแวดล้อม โดย ฝักปอบิด – น�าฝักปอบิดจากจังหวัดตาก
มีอุณหภูมิ 25 ± 2˚ซ ความเข้มแสง 3,000 ลักซ์ จาก (แหล่งธรรมชาติ) จ�านวน 3 ตัวอย่าง และฝักปอบิด