Page 204 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2

420 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 21 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2566

(C 1 – C 2) 5 100
% recovery =
C 3

เมื่อ C1 คือ ความเข้มข้นของสารใน spiked sample
C2 คือ ความเข้มข้นของสารใน sample blank
C3 คือ ความเข้มข้นของสารที่เติม

3) การทดสอบความเที่ยง (precision) ใบกระท่อม เป็นเวลา 3 วัน ๆ ละ 10 ซ�้า ค�านวณหาค่า
repeatability: ท�าโดยวิเคราะห์หา เบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (% RSD) โดยมีเกณฑ์การ

ปริมาณสาร mitragynine ในสารสกัดใบกระท่อม ยอมรับคือ % RSD ต้องไม่เกิน 2.0
ซ�้า 10 ครั้ง ในวันเดียวกัน ค�านวณหาค่าเบี่ยงเบน 4) การทดสอบขีดจ�ากัดของการตรวจพบ
มาตรฐานสัมพัทธ์ (% RSD) โดยมีเกณฑ์การยอมรับ (limit of detection, LOD)

คือ % RSD ต้องไม่เกิน 2.0 ค�านวณค่า LOD จาก calibration curve ของกราฟ
intermediate precision: ท�าโดย ที่ได้จากผลการทดสอบความเป็นเส้นตรง (linearity)
วิเคราะห์หาปริมาณสาร mitragynine ในสารสกัด โดยค่า

LOD (mg/ml) = 3 5 standard error/slope

LOD (%w/w) = LOD (mg/ml) 5 ปริมาตรที่เตรียม (ml) 5 ระดับเจือจาง 5 100
1,000 5 น�้าหนักตัวอย่าง (g)

5) การทดสอบขีดจ�ากัดของการวัดเชิง curve ของกราฟที่ได้จากผลการทดสอบความเป็น
ปริมาณ (limit of quantitation, LOQ) เส้นตรง (linearity) โดยค่า

ค�านวณค่า LOQ จาก calibration

LOQ (mg/ml) = 10 5 standard error/slope

LOQ (%w/w) = LOQ (mg/ml) 5 ปริมาตรที่เตรียม (ml) 5 ระดับเจือจาง 5 100
1,000 5 น�้าหนักตัวอย่าง (g)

6) การยืนยันค่าขีดจ�ากัดของการวัดเชิง ratio) โดยมีเกณฑ์การยอมรับคือ ค่า % RSD ต้อง
ปริมาณ (LOQ) มีค่าไม่เกิน 3 ค่า % recovery ต้องอยู่ในช่วงร้อยละ

เตรียมสารละลาย spiked sample 95-105 และ HORRAT ต้องไม่เกิน 2
ให้มีความเข้มข้นใกล้เคียงกับค่า LOQ ที่ค�านวณได้ 7) การทดสอบความจ�าเพาะ (specificity)
แล้วตรวจวิเคราะห์ปริมาณ mitragynine ใน spiked วิเคราะห์สารละลายมาตรฐาน mitragy-

sample ด้วยเครื่อง UHPLC จ�านวน 6 ซ�้า ค�านวณค่า nine ความเข้มข้น 0.010 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร และสาร
% RSD ค่า % recovery และ HORRAT (Horwitz สกัดใบกระท่อมด้วยเครื่อง UHPLC เพื่อตรวจสอบ