Page 101 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

J Thai Trad Alt Med Vol. 20 No. 3 Sep-Dec 2022 515

ไม่ท�าให้ resazurin เปลี่ยนสีคือค่าความเข้มข้นต�่าสุด ตัวอย่างจะถูกน�าไปท�าการทดสอบ โดยจะมีการท�าซ�้า
ที่ยับยั้งเชื้อได้ (MIC) จากนั้นจึงน�าสารสกัดที่มีฤทธิ์ 3 ครั้งในทุก ๆ การทดสอบ และท�าการหาค่าเฉลี่ยและ

ยับยั้งการเจริญของเชื้อ มาท�าการทดสอบหาค่าความ ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของค่าที่ได้ แล้วจึงรายงานผล
เข้มข้นต�่าสุดที่ฆ่าเชื้อได้ (MFC) โดยหยดสารละลาย ในรูปของค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน
ลงไปบนอาหารเลี้ยงเชื้อ SDA แล้วน�าไปบ่มที่อุณหภูมิ ผลกำรศึกษำ

37˚ซ. เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ความเข้มข้นต�่าสุดที่ไม่มี
เชื้อเจริญจะถูกบันทึกเป็นค่า MFC ส�าหรับ positive 1. ฤทธิ์ควำมเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง
control จะใช้ยา Amphotericin B เตรียมที่ความ ในการศึกษาฤทธิ์ความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง

เข้มข้น 100 mg/mL ละลายใน DMSO แล้วน�าไปเจือ รังไข่และเซลล์มะเร็งมดลูกของสารสกัดต�ารับยาแก้
จางด้วยอาหาร MHB โดยเตรียมแบบเจือจางลดลง 2 มะเร็งในมดลูกพบว่าสารสกัดเอทานอลและน�้าของ
เท่า (serial 2-fold dilution) ให้มีความเข้มข้นต่าง ๆ ต�ารับยาดังกล่าวไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งทั้ง

กัน โดยความเข้มข้นสูงสุดในการเตรียมเพื่อทดสอบ สองชนิดได้ โดยพบว่าค่าความเข้มข้นของสารสกัดที่
จะมีค่าเท่ากับ 1 mg/mL แล้วจึงน�าไปท�าการทดสอบ สามารถยับยั้งเซลล์มะเร็งได้ร้อยละ 50 (IC 50) นั้นมี

เช่นเดียวกับขั้นตอนการทดสอบผลของสารสกัด ค่าสูงกว่าความเข้มข้นสูงสุดที่ท�าการทดสอบคือ 100
2.5 การวิเคราะห์หาปริมาณสารประกอบฟีนอลิก µg/mL (ตารางที่ 1) ในกรณีสารสกัดของสมุนไพร
รวมด้วย Folin-Ciocalteu’s reagent เดี่ยวในต�ารับ พบว่าสารสกัดเอทานอล และสารสกัด

สารสกัดต�ารับและสมุนไพรเดี่ยวจะถูกเตรียม น�้าเกือบทุกชนิดไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งรังไข่
ที่ความเข้มข้น 1 mg/mL จากนั้นท�าการปิเปตสาร โดยแสดงค่า IC 50 มากกว่า 100 µg/mL ยกเว้นสาร

ตัวอย่างใส่ลงในเพลท 96 หลุม (100 µL/หลุม) แล้ว สกัดชั้นเอทานอลของรากนมแมวที่มีค่า IC 50 เท่ากับ
เติมสารละลาย Folin-Ciocalteu reagent 100 µL/ 54.46 ± 0.67 µg/mL ส�าหรับฤทธิ์ความเป็นพิษต่อ
หลุม และสารละลาย 20% sodium carbonate 80 เซลล์มะเร็งมดลูกพบว่าสารสกัดสมุนไพรเดี่ยวชั้น

µL/หลุม บ่ม 30 นาที ที่อุณหภูมิห้อง น�าไปวัดค่าการ เอทานอลของรากนมแมว หัวข้าวเย็นใต้และหนอน
[22]
ดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 760 นาโนเมตร จาก ตายหยากมีความเป็นเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งมดลูก
นั้นค�านวณหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกรวมโดย โดยมีค่า IC 50 เท่ากับ 30.06 ± 0.79, 48.26 ± 4.88

เทียบกับกราฟมาตรฐานของ gallic acid ซึ่งเตรียม และ 69.29 ± 4.47 µg/mL ตามล�าดับ แต่มีฤทธิ์
ความเข้มข้นเรียงล�าดับจากเข้มข้นน้อยไปมาก ได้แก่ ความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งทั้งสองชนิดน้อยกว่ายา
0, 30, 50, 70, 150, 200, และ 400 µL /mL ตามล�าดับ Paclitaxel (ยามาตรฐาน) ที่มีค่า IC 50 เท่ากับ 1.30 5

โดยกราฟมาตรฐานที่ได้จะเป็นเส้นตรง โดยให้มีค่า 10 ± 1.14 5 10 และ 5.86 5 10 ± 2.33 5 10 -12
-4
-11
-5
2
correlation coefficient (R ) ≥ 0.995 จากนั้นรายงาน µg/mL ต่อเซลล์มะเร็งรังไข่ และเซลล์มะเร็งมดลูก
ค่าเป็นมิลลิกรัม gallic acid ต่อกรัมของสารสกัด ตามล�าดับ (ตารางที่ 1)
2.6 การรายงานผล
สารสกัดทั้งชั้นน�้าและชั้นเอทานอลทั้งหมด 12