Page 99 - วารสารปีที่15ฉบับที่3
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              ∑’Ëæ∫‰¥â∫àÕ¬„πªí®®ÿ∫—π º≈¢Õß°“√»÷°…“ “¡“√∂π”  ‡´≈‡´’¬  ‡ªìπ‡«≈“ 16 - 18 ™—Ë«‚¡ß  ·≈â«π”¡“‡®◊Õ
              ‰ªæ—≤𓇪ìπ¬“μâ“π‡™◊ÈÕ·∫§∑’‡√’¬‰¥â„πÕπ“§μμàÕ‰ª  ®“ߥ⫬ “√≈–≈“¬ 0.85 % NaCl ‡∑’¬∫§«“¡¢ÿàπ°—∫
                                                          0.5 McFarland ‡æ◊ËÕ„À≥⮔π«π‡™◊ÈÕ·∫§∑’‡√’¬
                          √–‡∫’¬∫«‘∏’»÷°…“                ª√–¡“≥ 108 cfu/ml À≈—ß®“°π—Èπ ªÑ“¬‡™◊ÈÕ≈ß∫π

                                                          Õ“À“√‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕ Mueller-Hinton Agar (MHA)
              «— ¥ÿ·≈–«‘∏’°“√»÷°…“
                                                          «“ß·ºàπ°√–¥“…°√Õß What man No.1 ¢π“¥ 6
                   1. °“√‡μ√’¬¡μ—«Õ¬à“ß≈”μâπ™–‡Õ¡‡Àπ◊Õ    ¡‘≈≈‘‡¡μ√ ∑’Ë¡’ “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘π ®”π«π 25, 50, ·≈–
                   π”≈”μâπ¢Õß™–‡Õ¡‡Àπ◊Õ (Derris reticulata  75  μg/disc μ“¡≈”¥—∫ «‘∏’°“√‡μ√’¬¡ disc „Àâ¡’

              Craib.) ®“°ªÉ“ ¡ÿπ‰æ√ ®—ßÀ«—¥ª√“®’π∫ÿ√’ μ—¥‡ªìπ  ≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘πª√‘¡“≥¥—ß°≈à“« ∑”‰¥â‚¥¬≈–≈“¬ “√
              ™‘Èπ‡≈Á° Ê ·≈â«π”‰ªÕ∫„π Hot air oven ∑’ËÕÿ≥À¿Ÿ¡‘  ≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘π 2 mg/ml ¥â«¬ 0.1 N NaOH ·≈â«
              50 Õß»“‡´≈‡´’¬  ≈”μâπ∑’ËÕ∫·≈⫇°Á∫‰«â„π∑’Ë·Àâß  ªî‡ªμ≈ß∫π·ºàπ disc ∑—π∑’ª√‘¡“≥ 12.5, 25 ·≈–

              ‰¡à¡’§«“¡™◊Èπ ∑’ËÕÿ≥À¿Ÿ¡‘ÀâÕß ®π°«à“®–„™â𔉪„™â„π  37.5 μl μ“¡≈”¥—∫ „™â 0.1 N NaOH ·≈–¬“ªØ‘™’«π–
              °“√∑¥≈Õß                                    Ampicillin ‡ªìπ Vehicle control ·≈– Positive
                   2. °“√∑¥ Õ∫§«“¡∫√‘ ÿ∑∏‘Ï·≈–°“√æ‘ Ÿ®πå‡Õ°≈—°…≥å  control μ“¡≈”¥—∫ π”®“π‡æ“–‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕ‰ª∫à¡„πμŸâ

              ¢Õß “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘π                           Õ∫‡æ“–‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕÕÿ≥À¿Ÿ¡‘ 37 Õß»“‡´≈‡´’¬  ‡ªìπ‡«≈“
                   ≈”μâπ™–‡Õ¡‡Àπ◊Õ∑’Ëμ—¥‡ªìπ™‘Èπ‡≈Á°®”π«π 60  24 ™—Ë«‚¡ß «—¥¢π“¥ inhibition zones √Õ∫·ºàπ
              °√—¡ π”¡“ °—¥¥â«¬‡Œ°‡´π ‚¥¬„™â Soxhlet extrac-  °√–¥“… °√Õß·≈â«∫—π∑÷°º≈ ∑”°“√∑¥≈Õß 3 §√—Èß

              tor À≈—ß®“°π—Èππ” “√≈–≈“¬∑’ˉ¥âπ”¡“≈â“ߥ⫬πÈ” 2   3.2 «‘∏’ Minimum inhibition concen-
              §√—Èß π” à«π∫π∑’ˇªìπ™—Èπ¢Õ߇Œ°‡´π·¬°ÕÕ°¡“  tration (MIC) ·≈– Minimum bactericidal con-

              ·≈â«∑”°“√·¬° “√„Àâ∫√‘ ÿ∑∏‘ϥ⫬«‘∏’ Crystallization  centration (MBC)
              À≈—ß®“°π—Èπ∑¥ Õ∫§«“¡∫√‘ ÿ∑∏‘Ï¢Õß “√‡∫◊ÈÕßμâπ¥â«¬   ∑”°“√∑¥ Õ∫¥â«¬«‘∏’ Microdilution
                                                                                                [9]
              «‘∏’ Thin layer chromatography ∫π·ºàπ Silica  method „πÀ≈ÿ¡‡æ“–‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕ 96 well plate
              gel G  F2  Õ–≈Ÿ¡‘‡π’¬¡ ‚¥¬„™â Dichrolometh-  ≈–≈“¬ “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘π „π 0.1 N NaOH ·≈â«‡μ‘¡
                   60  54
                                           [6]
              ane: Methanol „πÕ—μ√“ à«π 95:5  ·≈–æ‘ Ÿ®πå  ≈ß„πÀ≈ÿ¡‡æ“–‡™◊ÈÕ∑’Ë¡’Õ“À“√‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕ MHB „Àâ¡’
              ‡Õ°≈—°…≥å¢Õß “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘π‡À¡◊Õπ°—∫°“√»÷°…“  §«“¡‡¢â¡¢âπ¢Õß “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘πμ—Èß·μà 0.25 - 512 μg/
                                  [7]
              ¢Õß °¡≈ Õ¬Ÿà ÿ¢·≈–§≥–                       ml ¥â«¬«‘∏’ two-fold serial dilutions À≈—ß®“°π—Èπ
                   3. °“√∑¥ Õ∫ƒ∑∏‘Ïμâ“π·∫§∑’‡√’¬          ‡μ‘¡‡™◊ÈÕ Bacillus cereus „Àâ¡’®”π«π‡™◊ÈÕ ÿ¥∑⓬
                                                                              5
                     3.1 «‘∏’ Disc diffusion              „πÀ≈ÿ¡∑¥≈Õ߇∑à“°—∫ 5×10  cfu/ml °“√∑¥≈Õߥ⫬
                     ·∫§∑’‡√’¬∑’Ë„™â„π°“√∑¥ Õ∫§◊Õ Bacillus  «‘∏’π’È„™â¬“ªØ‘™’«π– Ampicillin, 0.1 N NaOH
              cereus (TISTR 687) ‚¥¬‡æ“–‡≈’Ȭ߷∫§∑’‡√’¬„π  ·≈–À≈ÿ¡∑’ˉ¡à„ à “√≈Ÿªîπ‘øÕ≈‘𠇪ìπ positive, ve-

              Õ“À“√ Mueller-Hinton Broth (MHB) ∫ࡇ™◊ÈÕ„Àâ  hicle control ·≈– negative control μ“¡≈”¥—∫
              ‡®√‘≠‡μ‘∫‚μ∑’ËμŸâÕ∫‡æ“–‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕÕÿ≥À¿Ÿ¡‘ 37 Õß»“  π”À≈ÿ¡‡æ“–‡≈’Ȭ߇™◊ÈÕ 96 well plate ‰ª ∫à¡„πμŸâÕ∫
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