Page 186 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2
P. 186
402 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 21 ฉบับที่ 2 พฤษภาคม-สิงหาคม 2566
%recovery = (C1 – C2) 5 100 ตัวอย่างรากกัญชา ซ�้า 10 ครั้ง ในวันเดียวกัน ค�านวณ
C3 ค่าร้อยละส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (%RSD)
เมื่อ C1 คือ ความเข้มข้นของสารใน spiked intermediate precision วิเคราะห์ปริมาณสาร
sample ฟริเดลีน ในตัวอย่างรากกัญชา เป็นเวลา 3 วัน ๆ ละ 10
C2 คือ ความเข้มข้นของสารใน sample ซ�้า ค�านวณค่าร้อยละส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์
blank 2.2.3 การทดสอบขีดจ�ากัดของการตรวจ
C3 คือ ความเข้มข้นของสารที่เติม พบ (Limit of Detection, LOD)
การทดสอบความเที่ยง ค�านวณค่าประมาณ (estimated) ของ
repeatability วิเคราะห์ปริมาณสารฟริเดลีน ใน LOD จาก calibration curve
LOD (µg/ml), ค่าประมาณ = 3 5 standard error/slope
LOD (%w/w), ค่าประมาณ = LOD (µg/ml) 5 ปริมาตรที่เตรียม (ml) 5 ระดับเจือจาง 5 100
1,000,000 5 น�้าหนักตัวอย่าง (g)
เตรียมสารละลายตัวอย่างรากกัญชา โดยชั่ง เตรียมสารละลาย spiked sample ให้มีความ
ตัวอย่างรากกัญชา 2 กรัม สกัดด้วยเฮกเซน โดย เข้มข้นใกล้เคียงกับค่าประมาณของ LOD แล้วตรวจ
วิธีรีฟลักซ์ เป็นเวลา 60 นาที กรองผ่านกระดาษกรอง วิเคราะห์ปริมาณฟริเดลีนใน spiked sample 6 ซ�้า
เบอร์ 4 น�าสารละลายที่ได้ไประเหยแห้งด้วยเครื่อง 2.2.4 การทดสอบขีดจ�ากัดของการวัดเชิง
ระเหยสุญญากาศ จากนั้นละลายและปรับปริมาตร ปริมาณ (Limit of Quantitation, LOQ)
ด้วยคลอโรฟอร์มจนครบ 5 มิลลิลิตร โดยใช้ขวด ค�านวณค่าประมาณของ LOQ จาก cali-
แก้ววัดปริมาตร bration curve ดังนี้
LOQ (µg/ml), ค่าประมาณ = 10 5 standard error/slope
LOQ (%w/w), ค่าประมาณ = LOQ (µg/ml) 5 ปริมาตรที่เตรียม (ml) 5 ระดับเจือจาง 5 100
1,000,000 5 น�้าหนักตัวอย่าง (g)
เตรียมสารละลาย spiked sample ให้มี ตัวอย่างเพื่อตรวจสอบการแยกองค์ประกอบทางเคมี
ความเข้มข้นใกล้เคียงกับค่าประมาณของ LOQ แล้ว ของสารในสารละลายตัวอย่างรากกัญชา และค่า hRf
ตรวจวิเคราะห์ปริมาณฟริเดลีนใน spiked sample 6 ที่เหมาะสมของฟริเดลีนในสารละลายตัวอย่างราก
ซ�้า ค�านวณค่าร้อยละส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ กัญชา
และร้อยละของการคืนกลับ 2.3 การวิเคราะห์ปริมาณฟริเดลีนในราก
2.2.5 การทดสอบความจ�าเพาะ (specificity) กัญชา
หยดสารละลาย standard solution ความ 2.3.1 การเตรียมสารละลายตัวอย่างราก
เข้มข้น 831.60 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร และสารละลาย กัญชา