Page 181 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 2 May-Aug 2023 397

Development and Method Validation of Friedelin Contents in Cannabis sativa
L. Roots Using Thin Layer Chromatography Densitometry

Thanawat Thongchin , Peradhama Thiemthieprat, Sayan Ruengkhet, Aussavashai Shuayprom
*
Medicinal Plant Research Institute, Department of Medical Sciences, Tiwanon Road, Talat Khwan, Mueang,
Nonthaburi 11000, Thailand
* Corresponding auther: thanawat.thongchin898@gmail.com

Abstract
Introduction and Objective: Friedelin is an active ingredient present in Cannabis sativa L. roots and pos-
sesses antioxidant, anti-inflammatory and pain relief properties. Although cannabis is widely used in traditional
medicine and as health products, there is no quality control method for it. The objective of this study was to develop
an analytical method for determining the friedelin content in C. sativa roots using thin layer chromatography (TLC)
densitometry.
Methods: A sample solution of C. sativa roots was injected into the TLC system. The solvent was a mixture
of toluene and chloroform (9:1 ratio). After that, the plate was sprayed with vanillin-H 2SO 4 solution and detected
with ultraviolet light (366 nm).
Results: This method was validated by establishing the linearity for friedelin concentrations ranging from
25.99 to 831.60 µg/mL with a determination correlation coefficient (r) of 0.9990. The % recovery was in the range
of 100.57–102.45%. The limits of detection and quantitation were equal to 0.006% and 0.021% w/w (dry weight
C. sativa roots, µg/µg), respectively. The average content of friedelin in C. sativa roots was 0.025% w/w (dry
weight C. sativa roots, µg/µg).
Discussion: In extracting C. sativa roots, hexane was chosen as a solvent because it has high nonpolar
properties; and it is able to dissolve more friedelin, a substance with nonpolar properties as well, from the C. sativa
roots, compared to ethanol extraction. In the newly developed analytical method, the stationary cycle used was
HPTLC plates, which were cheaper, compared to the columns of the GC-MS/FID method. Thus, a TLC dosimeter
was used to develop the method for determining the amount of friedelin in C. sativa roots.
Conclusion and Recommendation: This newly developed method is suitable and can be used to analyze
the content of friedelin in C. sativa roots; and the appropriate specification of friedelin content in C. sativa roots
can be established.

Key words: Cannabis sativa L. roots, friedelin, thin layer chromatography densitometry

บทน�ำและวัตถุประสงค์ ขาวอมเหลือง (Figure 1) สารออกฤทธิ์ในรากกัญชา

กัญชา มีชื่อทางวิทยาศาสตร์ว่า Cannabis ได้แก่ สารฟริเดลีนเป็นสารประกอบที่พบมากในราก
sativa L. จัดอยู่ในวงศ์ Cannabaceae มีชื่อเรียกอื่น กัญชา มีสรรพคุณ แก้ปวด ลดไข้ ต้านอักเสบ มีสูตร

เช่น กัญชาจีน, คุนเข้า, ปาง, ยานอ, Hashish, Hemp, โครงสร้าง (Figure 2) นอกจากนี้ยังพบสารกลุ่ม
Indian hemp, Marijuana เป็นต้น รากกัญชาจะ เทอร์พีน (terpene) ชื่ออีพิฟริเดลานอล (epifriedela-
[1]
ประกอบด้วยรากแก้ว และรากฝอยจ�านวนมาก มีสี nol) มีสรรพคุณต้านและยับยั้งการโตของเนื้องอก