Page 171 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 21 ฉบับที่ 2

J Thai Trad Alt Med Vol. 21 No. 2 May-Aug 2023 387

แล้วเติมสารละลายนินไฮดริน (ninhydrin) (เตรียม แอซีติก (gacial acetic acid), กรดฟอร์มิก (formic
โดยละลายนินไฮดริน จ�านวน 200 มิลลิกรัม ในน�้า acid) และน�้ากลั่น (distilled water) ในอัตราส่วน

[12]
กลั่น จ�านวน 10 มิลลิลิตร ) ปริมาตร 0.5 มิลลิลิตร 100:11:11:26 ให้เข้ากันดี น�ามาใส่ในโถแก้วโครมา-
สังเกตผลที่เกิดขึ้น ถ้าเป็นผลบวกสารละลายจะ โทกราฟี ทิ้งไว้อย่างน้อย 2 ชั่วโมง ก่อนใช้ เพื่อให้
เปลี่ยนเป็นสีม่วง บรรยากาศในโถแก้วอิ่มตัวด้วยวัฏภาคเคลื่อนที่

2) โครมาโทกราฟีผิวบาง (Thin Layer ก. วิธีการ
Chromatography) ใช้เครื่อง Automatic TLC Sampler 4
การเตรียมสารละลายตัวอย่าง หยดสารละลายตัวอย่าง ทั้ง 12 ตัวอย่าง ชนิดละ 6

ชั่งตัวอย่าง 1 กรัม เติมแอ็บโซลูทเอทานอล ไมโครลิตร และสารละลายมาตรฐาน 2 ไมโครลิตร ลง
30 มิลลิลิตร น�าไปรีฟลักซ์ นาน 30 นาที กรอง ระเหย บนแผ่นเคลือบซิลิกาเจล ขนาด 20 5 10 เซนติเมตร
ให้แห้งด้วยเครื่องระเหยสุญญากาศ จากนั้นละลาย ความหนา 0.25 มิลลิเมตร ในแนวระดับเดียวกัน

สารที่เหลือ (residue) ด้วยแอ็บโซลูทเอทานอล 3.0 (ความยาวของแถบประมาณ 6 มิลลิเมตร) โดยให้ห่าง
มิลลิลิตร จากขอบล่างของแผ่นประมาณ 15 มิลลิเมตร ห่างจาก

การเตรียมสารละลายมาตรฐาน ขอบด้านซ้ายและขวาประมาณ 10 มิลลิเมตร และให้
ละลายสารมาตรฐานกรดคลอโรจีนิค ให้มี มีระยะห่างระหว่างแถบของสารละลายตัวอย่างแต่ละ
ความเข้มข้น 1.0 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ในเมทานอล ชนิดไม่น้อยกว่า 4 มิลลิเมตร ผึ่งให้แห้ง แล้วน�าไปวาง

การเตรียมสารละลายทดสอบ (test solu- ในโถแก้วท�าโครมาโทกราฟีที่อิ่มตัวด้วยด้วยวัฏภาค
tion) เคลื่อนที่ ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้อง เมื่อวัฏภาคเคลื่อนที่ซึม

แนทเชอรัลโพรดักส์/โพลีเอทิลีนไกลคอล ขึ้นไปตามผิวที่ฉาบสูง 8 เซนติเมตร น�าแผ่นเคลือบ
(natural products/polyethylene glycol, NP/PEG ซิลิกาเจลออกมาผึ่งไว้ให้แห้งในตู้ดูดควัน แล้วน�าไป
test solution) [14] ตรวจสอบ

สารละลายเอ็นพี (NP) เตรียมโดยละลาย ข. การตรวจสอบ
สาร diphenylboric acid-2-aminoethyl ester ใน น�าแผ่นเคลือบซิลิกาเจลไปพ่นด้วย
เมทานอล ให้มีความเข้มข้นร้อยละ 1.0 โดยน�้าหนัก สารละลายทดสอบเอ็นพี/พีอีจี โดยมีเทคนิคดังนี้ น�า

ต่อปริมาตร ส่วนสารละลายพีอีจี (PEG) เตรียมโดย แผ่นเคลือบซิลิกาเจลไปท�าให้ร้อนที่อุณหภูมิ 80˚ซ
ละลายสาร polyethylene glycol 4000 ในเอทานอล นาน 10 นาที จากนั้นพ่นด้วยสารละลายเอ็นพีขณะ
ให้มีความเข้มข้นร้อยละ 5.0 โดยน�้าหนักต่อปริมาตร ที่แผ่นเคลือบซิลิกาเจลยังร้อน แล้วพ่นทับด้วย

การเตรียมวัฏภาคเคลื่อนที่ (mobile สารละลายพีอีจี ทิ้งไว้ให้แห้งในอากาศและสังเกต
phase) ผลภายใต้แสงอัลตราไวโอเลต (ultraviolet, UV)

เตรียมวัฏภาคเคลื่อนที่ที่พัฒนาเอง โดย ที่ความยาวคลื่น 366 นาโนเมตร (Table 2 and 3,
ผสมเอทธิลอะซีเตท (ethyl acetate), กรดแกลเชียล Figure 2)