Page 130 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

544 วารสารการแพทย์แผนไทยและการแพทย์ ทางเลือก ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

4) ปริมาณสิ่งสกัดด้วยน�้า [14] จากนั้นเตรียมสารละลายมาตรฐาน gallic acid โดย
ชั่งตัวอย่างจ�านวน 5 กรัม ที่ทราบน�้าหนักที่ ให้มีความเข้มข้นของ gallic acid 1,000 ไมโครกรัม/

ถูกต้องเป็นทศนิยม 4 ต�าแหน่ง น�ามาหมักด้วยน�้าที่ มิลลิลิตร ในน�้า เตรียมสารละลายมาตรฐาน gallic
ท�าให้อิ่มตัวด้วย chloroform 100 มิลลิลิตร (เตรียม acid เจือจางให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1.6, 3.2,
โดยผสม chloroform 2.5 มิลลิลิตร กับน�้ากลั่น 900 4.8, 6.4, 8.0 และ 9.6 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ในน�้า แล้ว

มิลลิลิตร จากนั้นปรับปริมาตรด้วยน�้าจนครบ 1,000 ปิเปตสารละลายมาตรฐาน gallic acid เจือจางแต่ละ
มิลลิลิตร) ในขวดแก้วที่มีฝาปิดสนิทนาน 24 ชั่วโมง ความเข้มข้นลงในหลอดทดลองแต่ละหลอด จ�านวน

โดย 6 ชั่วโมงแรก ให้เขย่าด้วยเครื่องเขย่า ตั้งทิ้ง 1.0 มิลลิลิตร เติมสารละลายเจือจาง Folin-Ciocal-
ไว้ 18 ชั่วโมง กรอง น�าสารละลายที่กรองได้ จ�านวน teau’s phenol reagent ร้อยละ 10.0 โดยปริมาตร

20.0 มิลลิลิตร ใส่ในถ้วยปากกว้างที่ทราบน�้าหนักคงที่ จ�านวน 4.0 มิลลิลิตร ผสมให้เข้ากันดี เติมสารละลาย
ระเหยให้แห้งบนอ่างอังไอน�้า น�าไปอบที่อุณหภูมิ 105 โซเดียมคาร์บอเนต (sodium carbonate) ที่ความเข้ม

องศาเซลเซียส จนได้น�้าหนักคงที่ น�าไปค�านวณหาค่า ข้นร้อยละ 10.0 โดยน�้าหนักต่อปริมาตร จ�านวน 4.0
ร้อยละของปริมาณสิ่งสกัดด้วยน�้า (ตารางที่ 4) มิลลิลิตร ผสมให้เข้ากันดี แล้วน�าหลอดทดลองไปแช่
5) ปริมาณสิ่งสกัดด้วยเอทานอล 95% [14] ในอ่างอังไอน�้าที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียส นาน 5

ชั่งตัวอย่างจ�านวน 5 กรัม ที่ทราบน�้าหนักที่ถูก นาที จากนั้นแช่ในน�้าที่อุณหภูมิห้องจนเย็นลง น�าไป
ต้องเป็นทศนิยม 4 ต�าแหน่ง น�ามาหมักด้วยเอทานอล วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 750 นาโนเมตร

95% จ�านวน 100 มิลลิลิตร ในขวดแก้วที่มีฝาปิด จ�านวน 2 ครั้ง หาค่าเฉลี่ย (A) เมื่อเปรียบเทียบกับ
สนิท นาน 24 ชั่วโมง โดย 6 ชั่วโมงแรก ให้เขย่าด้วย หลอดควบคุมที่ใช้น�้า 1.0 มิลลิลิตร แทนสารละลาย

เครื่องเขย่า ตั้งทิ้งไว้ 18 ชั่วโมง กรอง น�าสารละลายที่ มาตรฐาน วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นเช่น
กรองได้ จ�านวน 20.0 มิลลิลิตร ใส่ในถ้วยปากกว้างที่ เดียวกัน (C) น�าค่าเฉลี่ยของ A-C แล้วน�าค่าที่ได้มา

ทราบน�้าหนักคงที่ ระเหยให้แห้งบนอ่างอังไอน�้า น�าไป แสดงเป็นกราฟมาตรฐาน (ภาพที่ 3) โดยแกน Y เป็น
อบที่อุณหภูมิ 105 องศาเซลเซียส จนได้น�้าหนักคงที่ ค่าการดูดกลืนแสงของ A-C และแกน X เป็นความ
น�าไปค�านวณหาค่าร้อยละของปริมาณสิ่งสกัดด้วย เข้มข้นของ gallic acid พบว่ากราฟมาตรฐานเป็นเส้น

เอทานอล 95% (ตารางที่ 4) ตรง และมีค่าสัมประสิทธิ์เส้นตรงดังนี้ Y = 0.0934X
2.3 การศึกษาปริมาณสารส�าคัญ (assay) + 0.0044, R = 0.9995 ส�าหรับสารละลายตัวอย่าง
2
1) ปริมาณรวมของสาร phenolic ค�านวณใน ท�าซ�้าเช่นเดียวกันกับสารละลายมาตรฐาน โดยให้เจือ
รูป gallic acid [15] จางสารละลายตัวอย่างลงห้าเท่า แล้วน�าไปค�านวณ
ชั่งตัวอย่าง 200 มิลลิกรัม ที่ทราบน�้าหนักที่ถูก เปรียบเทียบค่าการดูดกลืนแสงกับกราฟมาตรฐาน

ต้อง เป็นทศนิยม 4 ต�าแหน่ง เติมน�้า 20 มิลลิลิตร น�าไป เพื่อวิเคราะห์ปริมาณรวมของสาร phenolic ค�านวณ
โซนิเคท (sonicate) นาน 30 นาที กรอง ปรับปริมาตร ในรูป gallic acid ในใบชะมวงแห้ง (ตารางที่ 4)

ให้ได้ความเข้มข้น 10.0 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ในน�้า