Page 127 - วารสารการแพทย์แผนไทย ปีที่ 20 ฉบับที่ 3 กันยายน-ธันวาคม 2565

J Thai Trad Alt Med Vol. 20 No. 3 Sep-Dec 2022 541

มิลลิลิตร ขอบด้านซ้ายและขวาประมาณ 10 มิลลิเมตร และให้
2.2) การเตรียมสารละลายมาตรฐาน มีระยะห่างระหว่างแถบของสารละลายตัวอย่างแต่ละ

ละลายสารมาตรฐาน orientin ให้มีความเข้มข้น 1.0 ชนิดไม่น้อยกว่า 4 มิลลิเมตร ผึ่งให้แห้ง แล้วน�าไปวาง
มิลลิกรัม/มิลลิลิตร ใน absolute ethanol ในถังท�าโครมาโทกราฟีที่อิ่มตัวด้วย mobile phase
2.3) การเตรียมสารละลายทดสอบ (test ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้อง เมื่อ mobile phase ซึมขึ้นไป

solution) ตามผิวที่ฉาบสูง 8 เซนติเมตร น�าแผ่นเคลือบซิลิกา
แนทเชอรัลโพรดักส์/โพลีเอทิลีนไกลคอล เจล ออกมาผึ่งไว้ให้แห้งในตู้ดูดควัน แล้วน�าไปตรวจ
(Natural Products/Polyethylene Glycol, NP/ สอบ

PEG test solution) [13] ข. การตรวจสอบ
สารละลายเอ็นพี (NP) เตรียมโดยละลาย น�าแผ่นเคลือบซิลิกาเจลไปพ่นด้วย สาร
สาร diphenylboric acid-2-aminoethyl ester ละลายทดสอบ NP/PEG โดยมีเทคนิคดังนี้ น�าแผ่น

ในmethanol ให้มีความเข้มข้นร้อยละ 1.0 โดย เคลือบซิลิกาเจลไปท�าให้ร้อน ที่อุณหภูมิ 80 องศา
น�้าหนักต่อปริมาตร ส่วนสารละลายพีอีจี (PEG) เซลเซียส นาน 10 นาที จากนั้นพ่นด้วยสารละลาย

เตรียมโดย ละลายสาร polyethylene glycol 4000 NP ขณะที่แผ่นเคลือบซิลิกาเจลยังร้อน จากนั้นพ่น
ใน ethanol ให้มีความเข้มข้นร้อยละ 5.0 โดยน�้าหนัก ทับด้วยสารละลาย PEG ทิ้งไว้ให้แห้งในอากาศ และ
ต่อปริมาตร สังเกตผลภายใต้แสงอัลตราไวโอเลต (ultraviolet,

2.4) การเตรียมวัฏภาคเคลื่อนที่ (mobile UV) ที่ความยาวคลื่น 366 นาโนเมตร (ตารางที่ 2 และ
phase) 3, ภาพที่ 2)

เตรียม mobile phase ที่พัฒนาเอง โดย 2.2 การศึกษาคุณสมบัติทางกายภาพและทาง
ผสม ethyl acetate, gacial acetic acid, formic เคมี (physico-chemical properties) [14]
acid และ DI Water ในอัตราส่วน 100:11:11:27 ให้ 1) ปริมาณความชื้นด้วยวิธี gravimetric [14]

เข้ากันดี น�ามาใส่ในถังโครมาโทกราฟี ทิ้งไว้อย่างน้อย ชั่งตัวอย่างจ�านวน 5 กรัม ที่ทราบน�้าหนักที่ถูก
2 ชั่วโมง ก่อนใช้ เพื่อให้บรรยากาศในถังอิ่มตัวด้วย ต้องเป็นทศนิยม 4 ต�าแหน่งในขวดชั่งน�้าหนักที่ทราบ
mobile phase น�้าหนักคงที่ น�าไปอบที่อุณหภูมิ 105 องศาเซลเซียส

ก. วิธีการ นาน 5 ชั่วโมง และอบต่ออีก 1 ชั่วโมง ท�าให้เย็นลง
ใช้เครื่อง Automatic TLC Sampler 4 ในโถแก้วดูดความชื้นที่ใส่ซิลิกาเจล เพื่อหาน�้าหนัก
หยดสารละลายตัวอย่าง ทั้ง 17 ตัวอย่าง ชนิดละ 1 คงที่ (หมายถึง น�้าหนักที่ได้จากการชั่ง 2 ครั้ง มีค่าต่าง

ไมโครลิตร และสารละลายมาตรฐาน 1 ไมโครลิตร ลง กันไม่เกิน 0.5 มิลลิกรัม โดยการชั่งครั้งที่สองเพื่อหา
บนแผ่นเคลือบซิลิกาเจล ขนาด 20 5 10 เซนติเมตร ความแตกต่างของน�้าหนัก จะชั่งภายหลังจากการอบ

ความหนา 0.25 มิลลิเมตร ในแนวระดับเดียวกัน ที่ใช้เวลาเพิ่มขึ้นอีกหนึ่งชั่วโมง) น�าไปค�านวณหาค่า
(ความยาวของแถบประมาณ 6 มิลลิเมตร) โดยให้ห่าง ร้อยละของปริมาณความชื้นโดยค�านวณจากน�้าหนักที่
จากขอบล่างของแผ่นประมาณ 15 มิลลิเมตร ห่างจาก สูญเสียไปเมื่ออบให้แห้ง (ตารางที่ 4)